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多重PCR-變性高效液相色譜快速檢測(cè)單核細(xì)胞增生李斯特菌毒力基因方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-09-13 16:40

  本文關(guān)鍵詞:多重PCR-變性高效液相色譜快速檢測(cè)單核細(xì)胞增生李斯特菌毒力基因方法的建立


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【摘要】:目的建立單增李斯特菌的多個(gè)靶基因快速檢測(cè)手段,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。方法根據(jù)單增李斯特菌4個(gè)毒力基因(hly、prfA、inlA、inlB)設(shè)計(jì)引物,通過(guò)優(yōu)化引物濃度和引物組合,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)變性高效液相色譜(DHPLC)進(jìn)行快速檢測(cè)。結(jié)果出峰順序依次為inlB、hly、inlA、prfA,擴(kuò)增片段大小為146、210、255、388 bp,此方法具有良好的特異性,靈敏度可達(dá)到280 cfu/ml。結(jié)論本方法可以滿(mǎn)足實(shí)際工作中食品微生物檢測(cè)的要求。
【作者單位】: 秦皇島出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】單增李斯特菌 毒力基因 變性高效液相色譜 多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 食源性致病菌 食品安全
【分類(lèi)號(hào)】:R346
【正文快照】: 單核細(xì)胞增生李斯特菌(L.moncytogenes,以下簡(jiǎn)稱(chēng)單增李斯特菌)是人畜共患病的致病菌,侵襲性胞內(nèi)寄生,能穿越宿主的腸道、血腦和胎盤(pán)三道屏障[1],可導(dǎo)致胃腸炎、腦膜炎、敗血癥、流產(chǎn)等,病死率高達(dá)20%~30%[2]。單增李斯特菌在環(huán)境和生物體內(nèi)分布廣泛,其生存溫度、pH范圍較寬,在

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 楊大偉;劉云國(guó);譚樂(lè)義;周裔斌;祝素珍;王建廣;賈俊濤;姜英輝;;食品中A型肉毒梭菌PCR-DHPLC檢測(cè)方法的建立[J];食品工業(yè)科技;2011年06期

2 于豐宇;李林;王紅;王文斟;何源;劉曉朋;凌華;;應(yīng)用PCR技術(shù)快速測(cè)定食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌毒力[J];食品科學(xué);2010年23期

3 曹際娟;閆平平;徐君怡;鄭秋月;馬惠蕊;謝明杰;;單核細(xì)胞增生李斯特氏菌PCR-DHPLC檢測(cè)新技術(shù)的建立[J];生物技術(shù)通報(bào);2008年S1期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 鄭秋月;熱加工食品和水產(chǎn)品中致病菌檢測(cè)技術(shù)體系建立[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 何建華;徐冬e,

本文編號(hào):844845


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