本文關(guān)鍵詞：小鼠附睪脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定

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【摘要】：背景:脂肪干細(xì)胞作為一種新的成體干細(xì)胞,具有來源豐富、取材容易、增殖能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),受到人們越來越多地關(guān)注。目的:體外分離培養(yǎng)小鼠附睪脂肪組織中的脂肪干細(xì)胞,并鑒定其生物學(xué)特性。方法:無菌切取小鼠附睪處脂肪組織,采用膠原酶進(jìn)行消化,利用1次消化多次收集與差速貼壁法分離純化脂肪干細(xì)胞。倒置顯微鏡及透射電子顯微鏡觀察脂肪干細(xì)胞的形態(tài)。繪制脂肪干細(xì)胞的生長曲線。流式細(xì)胞術(shù)檢測脂肪干細(xì)胞的免疫表型。加入細(xì)胞誘導(dǎo)劑對脂肪干細(xì)胞進(jìn)行成骨及成脂肪的誘導(dǎo)分化。掃描電子顯微鏡觀察脂肪干細(xì)胞與膠原支架材料的相容性。結(jié)果與結(jié)論:倒置顯微鏡下可見脂肪干細(xì)胞呈長梭形或成纖維細(xì)胞樣,密集排列成漩渦狀或成束狀交織,可在體外穩(wěn)定傳至第9代。透射電子顯微鏡下可見脂肪干細(xì)胞表面有豐富的微絨毛結(jié)構(gòu),細(xì)胞核體積大,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器。脂肪干細(xì)胞表達(dá)CD44、CD29,不表達(dá)CD34。經(jīng)成脂肪誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后,多數(shù)脂肪干細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見小脂滴,油紅O染色可將小脂滴染成紅色。經(jīng)成骨誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)后,在脂肪干細(xì)胞生長密集區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊、細(xì)胞間界限不清楚。經(jīng)茜素紅染色后,可見較多大小不一的折光率較強(qiáng)顆粒狀結(jié)構(gòu)沉積。掃描電子顯微鏡觀察到脂肪干細(xì)胞呈鋪展?fàn)钌L于膠原支架材料上。結(jié)果表明該方法分離出的脂肪干細(xì)胞能在體外擴(kuò)增并穩(wěn)定傳代,在一定誘導(dǎo)條件下,能夠分化為成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞并且與膠原支架具有良好的相容性。
【作者單位】： 吉林大學(xué)第四醫(yī)院;吉林大學(xué)病理生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系;吉林大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 脂肪組織 附睪 小鼠 近交BALB C 細(xì)胞 培養(yǎng)的 脂肪干細(xì)胞 小鼠 差速貼壁 培養(yǎng)
【基金】：吉林省科技發(fā)展計(jì)劃青年科研基金資助項(xiàng)目(20090192)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction組織工程學(xué)是生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)中的新的分支,是應(yīng)用生命科學(xué)和工程學(xué)的原理與技術(shù),設(shè)計(jì)、構(gòu)造、改良、培育和保養(yǎng)活組織,以修復(fù)或重建組織器官的結(jié)構(gòu),維持或改善組織器官功能的一門新興的邊緣學(xué)科。組織工程學(xué)中最主要的研究內(nèi)容包括:種子細(xì)胞、供種子細(xì)胞生長

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