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抗弓形蟲SAG2蛋白單克隆抗體的制備及其免疫學特性鑒定

發(fā)布時間:2017-09-07 06:41

  本文關(guān)鍵詞:抗弓形蟲SAG2蛋白單克隆抗體的制備及其免疫學特性鑒定


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【摘要】:為制備抗弓形蟲SAG2蛋白的單克隆抗體(McAb),用純化的rSAG2蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融合,經(jīng)間接ELISA方法篩選穩(wěn)定分泌高效價McAb的雜交瘤細胞株,體內(nèi)誘生腹水法制備單抗。用ELISA方法測定其效價;單克隆抗體類型鑒定試紙條鑒定其類型;Western-blot和IFA試驗進行特異性鑒定。結(jié)果顯示,篩選出2株能穩(wěn)定分泌抗SAG2蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細胞株,分別被命名為5E2、2A8。間接ELISA測定其效價分別為1∶256 000、1∶128 000;2株單克隆抗體亞型均為IgG1型,輕鏈均為κ鏈;Western-blot與IFA試驗表明,這2株McAb均能夠特異性識別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,并且進一步說明此蛋白是位于弓形蟲膜表面的蛋白。成功獲得了具有較高特異性及敏感性的抗SAG2蛋白的單克隆抗體,并能特異性識別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,為弓形蟲病免疫診斷及基因工程亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學院;中國農(nóng)業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】弓形蟲 SAG 單克隆抗體
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(200803017)
【分類號】:R392
【正文快照】: 弓形蟲病是一種呈世界性分布且嚴重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病。孕婦感染弓形蟲后,可導致流產(chǎn)、畸胎、死胎或智力發(fā)育不全;免疫抑制或免疫缺陷患者感染弓形蟲后,可引起弓形蟲性腦炎、弓形蟲性視網(wǎng)膜脈絡(luò)炎等,嚴重者可致死。此外,弓形蟲也可引起家畜的高熱、呼吸系統(tǒng)及消

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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3 聶福旭;蔣蔚;王權(quán);陳永軍;胡永浩;;弓形蟲膜表面抗原SAG2蛋白的高效表達及免疫活性分析[J];生物技術(shù)通報;2010年04期

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【共引文獻】

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2 李華;言慧;陳白虹;劉敏;陳曉光;;弓形蟲SAG1的高密度發(fā)酵表達、純化及免疫反應性鑒定[J];南方醫(yī)科大學學報;2008年07期

3 任慶娥;周春香;菅復春;馮超;張龍現(xiàn);;弓形蟲病分子診斷技術(shù)研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2009年05期

4 米銳;李亞潔;孟楠;孫永欣;李學軍;溫志新;李樹英;;柞蠶微孢子蟲孢壁蛋白多克隆抗體的制備及鑒定[J];蠶業(yè)科學;2013年05期

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6 楊培梁;李華;周曉紅;彭鴻娟;吳q;陳曉光;;弓形蟲多表位基因重組抗原在弓形蟲免疫檢測中的應用[J];熱帶醫(yī)學雜志;2007年09期

7 鄒夢晨;言慧;吳q;陳曉光;李華;;用重組SAG1抗原檢測弓形蟲抗體[J];熱帶醫(yī)學雜志;2009年06期

8 秘文婷;姚碩;鐘志剛;楊培梁;吳q;陳曉光;;弓形蟲復合基因SAG1-BAG1的構(gòu)建、表達及重組抗原的免疫反應性分析[J];熱帶醫(yī)學雜志;2012年05期

9 聶福旭;蔣蔚;王權(quán);陳永軍;胡永浩;;弓形蟲膜表面抗原SAG2蛋白的高效表達及免疫活性分析[J];生物技術(shù)通報;2010年04期

10 張建偉;王海龍;殷國榮;劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);劉晉平;趙豐;;弓形蟲SAG1基因功能片段的克隆、表達與抗原性分析[J];山西醫(yī)科大學學報;2009年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王權(quán);蔣蔚;陳永軍;聶福旭;胡永浩;;弓形蟲膜表面抗原SAG2蛋白的高效表達及免疫活性分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學分會第三次學術(shù)研討會論文集[C];2012年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李華;弓形蟲病和廣州管圓線蟲病的免疫學診斷研究[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

2 楊培梁;弓形蟲多表位基因的疫苗研究及其重組抗原在免疫診斷中的應用[D];第一軍醫(yī)大學;2007年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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4 言慧;具有特異免疫反應活性的弓形蟲重組SAG1抗原及其單克隆抗體的制備、鑒定和初步應用[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

5 王際平;弓形蟲P30抗原單克隆抗體的制備、鑒定及初步應用[D];南華大學;2007年

6 任慶娥;河南省部分地區(qū)豬弓形蟲分離株基因型研究和弓形蟲RH株的細胞培養(yǎng)[D];河南農(nóng)業(yè)大學;2009年

7 郭凱;弓形蟲緩殖子期特異抗原BSR4的克隆、表達、純化與鑒定[D];蚌埠醫(yī)學院;2011年

8 周小偉;家蠶微孢子蟲(Nosema bombycis)功能基因組研究[D];西南大學;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾方銀,劉國章,陳曉光,李文盛,王s閼

本文編號:808007


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