抗弓形蟲SAG2蛋白單克隆抗體的制備及其免疫學特性鑒定
本文關(guān)鍵詞:抗弓形蟲SAG2蛋白單克隆抗體的制備及其免疫學特性鑒定
【摘要】:為制備抗弓形蟲SAG2蛋白的單克隆抗體(McAb),用純化的rSAG2蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融合,經(jīng)間接ELISA方法篩選穩(wěn)定分泌高效價McAb的雜交瘤細胞株,體內(nèi)誘生腹水法制備單抗。用ELISA方法測定其效價;單克隆抗體類型鑒定試紙條鑒定其類型;Western-blot和IFA試驗進行特異性鑒定。結(jié)果顯示,篩選出2株能穩(wěn)定分泌抗SAG2蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細胞株,分別被命名為5E2、2A8。間接ELISA測定其效價分別為1∶256 000、1∶128 000;2株單克隆抗體亞型均為IgG1型,輕鏈均為κ鏈;Western-blot與IFA試驗表明,這2株McAb均能夠特異性識別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,并且進一步說明此蛋白是位于弓形蟲膜表面的蛋白。成功獲得了具有較高特異性及敏感性的抗SAG2蛋白的單克隆抗體,并能特異性識別天然構(gòu)象的SAG2蛋白,為弓形蟲病免疫診斷及基因工程亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學院;中國農(nóng)業(yè)科學院上海獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 弓形蟲 SAG 單克隆抗體
【基金】:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(200803017)
【分類號】:R392
【正文快照】: 弓形蟲病是一種呈世界性分布且嚴重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病。孕婦感染弓形蟲后,可導致流產(chǎn)、畸胎、死胎或智力發(fā)育不全;免疫抑制或免疫缺陷患者感染弓形蟲后,可引起弓形蟲性腦炎、弓形蟲性視網(wǎng)膜脈絡(luò)炎等,嚴重者可致死。此外,弓形蟲也可引起家畜的高熱、呼吸系統(tǒng)及消
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本文編號:808007
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