本文關(guān)鍵詞：腸出血型大腸埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性分析

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【摘要】：目的利用Red重組系統(tǒng)構(gòu)建腸出血型大腸埃希菌(EHEC)O157:H7 ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法設(shè)計(jì)并合成一對(duì)同源臂引物,每條引物5'端與ppk基因同源,3'端與卡那霉素抗性基因同源,擴(kuò)增卡那霉素抗性基因片段;制備含有pKD46質(zhì)粒的EHEC O157:H7 EDL933w感受態(tài)細(xì)菌,然后將該抗性基因片段電擊轉(zhuǎn)化入制備的感受態(tài)菌株中;利用pKD46介導(dǎo)的Red重組系統(tǒng),通過(guò)同源重組替換EHEC O157:H7 EDL933w ppk基因,PCR和測(cè)序驗(yàn)證;通過(guò)革蘭染色、測(cè)D600值、吉姆薩染色比較EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突變株的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)能力和黏附性。結(jié)果構(gòu)建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的EHEC O157:H7 EDL933w突變菌株(EHEC O157:H7 EDL933wΔppk),初步探索了EHEC O157:H7 EDL933w野生株和突變株的生物學(xué)特性。結(jié)論本研究運(yùn)用Red重組系統(tǒng)構(gòu)建了腸出血型大腸埃希菌O157:H7 ppk基因缺失株,為進(jìn)一步研究腸出血型大腸埃希菌中ppk基因的調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院BSL-3實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： EHECO H ppk基因 Red重組系統(tǒng) 基因突變
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81371765) 廣東省自然科學(xué)基金(S2013010014393)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R378.21;R3416
【正文快照】： 腸出血型大腸埃希菌(enterohemorrhagicEscherichia coli,EHEC)O157:H7可引起人出血性結(jié)腸炎(hemorrhagic colitis,HC)、溶血性尿毒綜合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)以及血栓形成性血小板減少性紫癜(thrombotic thrombocytopenicpurpura,TTP)等[1]。在大腸埃希菌中,多聚

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 王恒，

本文編號(hào)：796336