發(fā)布時間：2017-08-27 10:06

  本文關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒2型CAP蛋白新型表位抗原肽的設(shè)計、合成及免疫原性研究

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【摘要】：目的設(shè)計合成PCV2 CAP的B細胞表位抗原肽并對其進行鑒定。方法采用DNAStar和BcePred分析軟件并結(jié)合吳玉章氨基酸抗原指數(shù)計算方法預(yù)測PCV2 CAP的B細胞表位,以此合成4分支多重抗原肽結(jié)構(gòu),同時串聯(lián)一個通用型Th表位;采用Fmoc法合成4分支PCV2 CAP多重抗原肽(MAP),通過高效反相液相色譜(RP-HPLC)、質(zhì)譜(MS)分析對其進行初步鑒定。以合成的抗原肽免疫昆明系小鼠及兔,觀察體液免疫反應(yīng)。結(jié)果初步篩選出3種抗原指數(shù)較高的表位,即98~103aa(命名為B98),156~162aa(命名為B156),228~233aa(命名為B228);合成的多重抗原肽經(jīng)RP-HPLC層析后,純度達到92.49%,MS鑒定其相對分子質(zhì)量一致,誤差小于0.1%。以合成的MAP疫苗免疫小鼠及兔后,可產(chǎn)生高滴度的特異性抗PCV2 CAP抗體。結(jié)論 PCV2 CAP的B細胞新表位多重抗原肽有免疫原作用,將為PCV2 CAP表位肽疫苗的研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 重慶理工大學藥學與生物工程學院;重慶市動物疫病預(yù)防控制中心;第三軍醫(yī)大學全軍免疫學研究所;
【關(guān)鍵詞】： PCV CAP B細胞表位 表位鑒定 ELISA
【基金】：重慶市科技攻關(guān)計劃項目(CSTC,2011AB1078,2012GG-YYJS80014) 重慶市基礎(chǔ)與前沿研究計劃項目(cstc2013jcyjA10068) 重慶市教委科學技術(shù)研究項目(KJ130802)
【分類號】：R392
【正文快照】： 豬圓環(huán)病毒病(porcine circovirus-associateddisease,PCVAD)是由PCV2引起的豬傳染病,能夠引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(post-weaningmultisystemic wasting syndrome,PMWS),侵害豬的免疫系統(tǒng),導致豬的免疫機能下降,造成多種疾病的并發(fā)或繼發(fā)感染,對養(yǎng)豬業(yè)造成極大的危害[1-2

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本文編號：745260