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針刺干預對顱腦損傷模型大鼠腦組織內(nèi)ERK表達及凋亡細胞的影響

發(fā)布時間:2017-08-23 10:23

  本文關(guān)鍵詞:針刺干預對顱腦損傷模型大鼠腦組織內(nèi)ERK表達及凋亡細胞的影響


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【摘要】:目的:通過制備大鼠顱腦損傷模型,對不同時間點介入的針刺治療效果進行對比研究,觀察針刺對腦細胞的保護作用和對細胞外信號調(diào)節(jié)激酶ERK的影響,從細胞凋亡的角度探討針刺治療顱腦損傷的作用機制,為臨床針刺治療顱腦損傷的最佳介入時間提供理論及實驗依據(jù)。方法:將70只健康雄性SD大鼠隨機分為6組:空白組、模型1組、模型2組、針刺1組、針刺2組和針刺3組,空白組20只,其余幾組每組10只。使用ECCI儀器制備顱腦損傷模型,打擊參數(shù)為5m/s,深度3mm。針刺1組、2組于造模后第2天開始治療,針刺3組于第8天開始治療,取百會、人中及受損部位對側(cè)肢體的曲池、合谷、足三里、涌泉穴,每日1次,每次留針3-5min,平補平瀉法。針刺1組、3組于治療后第8天取材,針刺2組于第15天取材,檢測相關(guān)指標。通過觀察大鼠行為狀態(tài)的變化,評價針刺對顱腦損傷的治療效應;采用免疫組化技術(shù)及原位末端標記法(TUNEL)檢測各組大鼠腦組織內(nèi)ERK表達和凋亡細胞的變化。結(jié)果:針刺對顱腦損傷模型大鼠凋亡腦細胞和腦組織中細胞外信號調(diào)節(jié)激酶ERK的表達有影響。分別于打擊后第9日和第16日觀察針刺組和模型組老鼠的行為狀態(tài)及神經(jīng)功能的變化,通過對比針刺各組大鼠的神經(jīng)功能、平衡能力和行走能力,結(jié)果顯示,針刺2組的各項能力比針刺1組好,針刺1組又優(yōu)于針刺3組,針刺組各項能力普遍比模型對照組好,但比空白組差。采用免疫組織化學方法和原位末端標記法分別檢測各組大鼠腦組織內(nèi)ERK的表達和凋亡腦細胞。結(jié)果顯示,針刺2組的ERK表達率和腦細胞凋亡率比針刺1組低(P0.01);針刺1組的ERK表達率和腦細胞凋亡率比針刺3組低(P0.01);針刺各組的的ERK表達率和腦細胞凋亡率普遍低于模型組(P0.01);結(jié)論:本實驗證明:1.針刺能有效改善顱腦損傷大鼠的神經(jīng)功能和運動功能,且針刺介入越早,治療時間越長,療效越好。2.針刺的治療效應及腦保護作用的機理可能與下調(diào)細胞外信號調(diào)節(jié)激酶ERK的表達,抑制腦細胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:針刺治療 顱腦損傷 細胞凋亡 ERK
【學位授予單位】:陜西中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R245;R-332
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-6
  • 中英文縮略語對照表6-9
  • 引言9-11
  • 第一部分 文獻回顧11-21
  • 一、現(xiàn)代醫(yī)學對顱腦損傷的研究11-16
  • 1.“創(chuàng)傷性半暗帶”的提出11
  • 2.“半暗帶”重要的病理生理變化----細胞凋亡11-12
  • 3.影響細胞凋亡的內(nèi)環(huán)境因素12-13
  • 3.1 興奮性氨基酸與鈣離子超載12
  • 3.2 局部缺血缺氧與血腦屏障的破壞12-13
  • 3.3 氧自由基過度產(chǎn)生13
  • 3.4 炎癥反應13
  • 4.細胞凋亡的通路研究13-15
  • 4.1 線粒體通路13-14
  • 4.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路14
  • 4.3 死亡受體通路14-15
  • 5.ERK的研究意義15-16
  • 二、祖國醫(yī)學對顱腦損傷的認識16-17
  • 1.病名沿革16
  • 2.病因病機16-17
  • 2.1 瘀血阻滯16-17
  • 2.2 水濕內(nèi)停17
  • 2.3 痰濁瘀阻17
  • 2.4 髓海虛損17
  • 2.5 氣機失調(diào)17
  • 三、針灸對顱腦損傷治療的研究概況17-21
  • 1.針灸治療顱腦損傷的臨床研究17-19
  • 1.1 醒腦開竅針法17-18
  • 1.2 頭針療法18
  • 1.3 體針療法18
  • 1.4 電針療法18-19
  • 1.5 穴位注射療法19
  • 1.6 其他針法19
  • 2.針灸影響腦細胞凋亡的實驗研究進展19-21
  • 第二部分 實驗研究21-31
  • 實驗一 針刺對TBI大鼠的療效研究21-25
  • 1.實驗材料21
  • 1.1 實驗動物21
  • 1.2 主要藥品及試劑21
  • 1.3 主要儀器21
  • 2.實驗方法21-24
  • 2.1 實驗動物及分組21-22
  • 2.2 動物模型的建立22
  • 2.3 針刺治療方案22-23
  • 2.4 針刺療效評價方法23-24
  • 3. 實驗結(jié)果24-25
  • 實驗二 針刺對凋亡腦神經(jīng)元和腦組織內(nèi)ERK表達的影響25-31
  • 1. 實驗材料25-26
  • 1.1 實驗動物25
  • 1.2 主要儀器和藥品25-26
  • 2. 實驗方法26-29
  • 2.1 動物分組26
  • 2.2 動物模型的建立26
  • 2.3 針刺治療方案26
  • 2.4 腦組織取材及切片制作26-27
  • 2.5 免疫組化法檢測腦組織內(nèi)ERK的表達情況27-28
  • 2.6 TUNEL法檢測凋亡腦細胞28-29
  • 3. 實驗結(jié)果29-31
  • 第三部分 討論31-35
  • 一 實驗動物的選擇31
  • 二 關(guān)于如何在模型制造過程中減少動物死亡31
  • 三 選穴依據(jù)31-32
  • 四 本實驗研究的特點32-33
  • 五 針刺對凋亡腦細胞的數(shù)量和腦組織內(nèi)ERK表達量的影響33-35
  • 第四部分 結(jié)論35-36
  • 第五部分 問題與展望36-37
  • 參考文獻37-42
  • 附錄42-46
  • 致謝46

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉文;黃文芳;盧賢瑜;;死亡受體信號傳導途徑研究進展[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2006年09期



本文編號:724487

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