本文關(guān)鍵詞：人血小板裂解液替代胎牛血清大規(guī)模擴(kuò)增人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

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【摘要】：背景:目前國內(nèi)外大多數(shù)實(shí)驗(yàn)仍采用經(jīng)典的培養(yǎng)基和胎牛血清進(jìn)行臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng),血清培養(yǎng)潛在的不安全因素限制了未來臨床應(yīng)用的可行性。目的:以人血小板裂解液替代胎牛血清培養(yǎng)、鑒定人間充質(zhì)干細(xì)胞,以期進(jìn)一步應(yīng)用于臨床低密度擴(kuò)增人間充質(zhì)干細(xì)胞。方法:人血小板裂解液通過反復(fù)凍融、離心、過濾、濃縮等方法制備。以IMDM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加5%濃縮血小板裂解液作為實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基;以添加體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清為對(duì)照組培養(yǎng)基。采用酶消化法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,以3 000/cm2的濃度進(jìn)行傳代培養(yǎng),待細(xì)胞擴(kuò)增至P5代后,進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)與直徑、免疫表型、成骨成脂分化、克隆形成率等細(xì)胞生物學(xué)特性檢測(cè),并比較兩者之間的差別。結(jié)果與結(jié)論:人血小板裂解液擴(kuò)增的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)細(xì)長,有更高的細(xì)胞累積群倍數(shù);克隆形成檢測(cè)結(jié)果顯示兩者形成的克隆效率差異無顯著性意義,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示兩者有相似的細(xì)胞表型,體外誘導(dǎo)分化顯示兩者都具有成骨、成脂分化能力,但人血小板裂解液擴(kuò)增的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化能力更強(qiáng)。提示人血小板裂解液可以取代胎牛血清用于臨床低密度擴(kuò)增人間充質(zhì)干細(xì)胞。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)組織胚胎學(xué)教研室;北京京蒙高科干細(xì)胞技術(shù)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 臍帶臍血干細(xì)胞 培養(yǎng) 間充質(zhì)干細(xì)胞 血小板裂解液 細(xì)胞培養(yǎng) 成骨分化 成脂分化
【基金】：內(nèi)蒙古自治區(qū)干細(xì)胞科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目(kjt0020947)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 文章亮點(diǎn):文章創(chuàng)新性地應(yīng)用人血小板裂解液低密度大規(guī)模擴(kuò)增臍帶間充干細(xì)胞,對(duì)比分析擴(kuò)增后臍帶間充干細(xì)胞的生物學(xué)特性,擬在體外建立一套簡(jiǎn)便規(guī)范、行之有效的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離、純化、培養(yǎng)、擴(kuò)增及鑒定體系。結(jié)果顯示人血小板裂解液培養(yǎng)基可以滿足臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外

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9 王丁;CD14~+單核細(xì)胞增強(qiáng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫抑制作用[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

10 李靜遠(yuǎn);人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞端粒調(diào)控機(jī)制的研究[D];浙江大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁波;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2009年

2 黃偉;臍血源間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2005年

3 鄧婷芬;臍血間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子支持人臍血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增的探討[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2009年

4 章守琴;人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞支持造血的體外研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

5 張茜真;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定以及干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)其重編程的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

6 陳義;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)及體外重建角膜后板層的初步研究[D];暨南大學(xué);2010年

7 齊凱;人臍帶來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化初探[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

8 馬蘭蘭;不同胎齡人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

9 田毅;人臍帶Wharton's jelly間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性以及其與腦腫瘤干細(xì)胞共培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

10 李敏;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞三維載體接種方法的研究[D];蘭州大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：708940