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脂肪移植治療DNCB誘導(dǎo)特應(yīng)性皮炎(AD)樣小鼠模型的研究

發(fā)布時間:2017-08-18 15:00

  本文關(guān)鍵詞:脂肪移植治療DNCB誘導(dǎo)特應(yīng)性皮炎(AD)樣小鼠模型的研究


  更多相關(guān)文章: 脂肪移植 特應(yīng)性皮炎(AD) Th1/Th2 Treg/Th17


【摘要】:目的:探究脂肪移植能否改善二硝基氯苯(DNCB)誘導(dǎo)特應(yīng)性皮炎(AD)樣小鼠模型的癥狀及其可能機(jī)制,為尋找治療AD的新方法奠定理論基礎(chǔ),為進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供更可靠的依據(jù)。方法:70只BALB/c雄性小鼠隨機(jī)分成實驗組(模型組)50只、正常對照組10只和脂肪供體組10只。DNCB外涂小鼠皮膚制備AD模型,正常對照組外涂等量丙酮,造模結(jié)束后將隨機(jī)抽取的實驗組小鼠10只及正常對照組小鼠處死,通過組織病理表現(xiàn)、血清及皮損相關(guān)細(xì)胞因子水平,明確小鼠AD樣模型構(gòu)建成功[1]。實驗組剩余40只小鼠隨機(jī)分為脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、模型自然修復(fù)組,每組各10只。2周后處死小鼠,取血及背部皮損處全層皮膚組織,HE染色觀察各組小鼠的皮膚組織病理改變;ELISA檢測血清中Ig E及IL-4水平;實時定量PCR(RT-PCR)檢測皮損中L-10、IL-17、IFN-γ表達(dá)水平[2]。結(jié)果:模型組小鼠的背部皮膚均出現(xiàn)紅斑、增厚、滲出、糜爛及明顯結(jié)痂現(xiàn)象,呈典型AD臨床表現(xiàn),外涂丙酮的正常對照組小鼠皮膚與實驗前無明顯改變,根據(jù)組織病理表現(xiàn)、細(xì)胞因子變化表明成功構(gòu)建出AD樣模型。脂肪移植術(shù)2周后,與模型組相比,脂肪移植治療組和藥物治療組均可以觀察到相比模型表皮厚度恢復(fù)正常,角質(zhì)層明顯變薄,假手術(shù)治療組及自然修復(fù)組未見明顯改變;與模型組比較,脂肪移植治療組和藥物治療組血清中Ig E、IL-4水平明顯較低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=11.322、10.403、5.783、6.358,p均0.05);假手術(shù)組及自然修復(fù)組無明顯下降,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.178、1.839、0.822、1.540,p均0.05)。脂肪移植治療組和藥物治療組皮膚組織中IL-10表達(dá)水平明顯較低,IFN-γ顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.809、7.328、-5.071、2.585、3.713、-3.051,p均0.05),而假手術(shù)組及自然修復(fù)組較模型組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.497、2.017、1.248、0.982、-0.894、-0.494,p均0.05)。結(jié)論:1.DNCB致敏BALB/c小鼠模型可構(gòu)建出類似人類特應(yīng)性皮炎;2.脂肪移植可顯著降低小鼠AD樣模型血清中Ig E、IL-4,減少皮損中IL-10、IL-17表達(dá),促進(jìn)IFN-γ的產(chǎn)生,減輕皮損炎癥,促進(jìn)小鼠模型皮損的恢復(fù);3.脂肪移植可能是通過調(diào)控Th1/Th2、Treg/Th17細(xì)胞失衡發(fā)揮治療AD的作用。
【關(guān)鍵詞】:脂肪移植 特應(yīng)性皮炎(AD) Th1/Th2 Treg/Th17
【學(xué)位授予單位】:湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R758.2;R-332
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • 英文摘要5-10
  • 第一章 前言10-13
  • 第二章 材料和方法13-24
  • 2.1 材料13-15
  • 2.1.1 主要試劑及藥品13
  • 2.1.2 主要試劑及藥品13
  • 2.1.3 主要實驗儀器及器械13-15
  • 2.2 實驗方法15-23
  • 2.2.1 建立AD樣小鼠模型15
  • 2.2.2 分組及處理15-16
  • 2.2.3 小鼠血標(biāo)本收集16
  • 2.2.4 皮膚組織病理切片的制作16-18
  • 2.2.5 血清Ig E、IL-4 水平測定方法18-19
  • 2.2.6 皮膚組織IL-10、IL-17、IFN-γ表達(dá)測方法19-23
  • 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析23-24
  • 第三章 結(jié)果24-37
  • 3.1 模型組與正常對照組比較24-27
  • 3.1.1 模型組與正常對照組皮損比較24
  • 3.1.2 模型組與正常對照組HE染色組織病理改變比較24-25
  • 3.1.3 模型組與正常對照組血清IgE、IL-4 比較25-26
  • 3.1.4 模型組與正常對照組皮膚組織中IL-10、IL-17、IFN-γ表達(dá)比較26-27
  • 3.2 脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、自然修復(fù)組與模型組比較27-37
  • 3.2.1 脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、自然修復(fù)組與模型組皮損比較27-30
  • 3.2.2 脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、自然修復(fù)組與模型組HE染色組織病理改變比較30-32
  • 3.2.3 脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、自然修復(fù)組與模型組血清IgE、IL-4 比較32-34
  • 3.2.4 脂肪移植治療組、假手術(shù)治療組、藥物治療陽性對照組、自然修復(fù)組與模型組皮膚組織中IL-10、IL-17、IFN-γ表達(dá)比較34-37
  • 第四章 討論37-42
  • 第五章 結(jié)論42-43
  • 參考文獻(xiàn)43-49
  • 綜述49-60
  • 參考文獻(xiàn)56-60
  • 英文縮寫詞表60-61
  • 致謝61-63
  • 在讀期間發(fā)表的主要學(xué)術(shù)論文及參與課題63-64

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本文編號:695181

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