發(fā)布時間：2017-08-18 07:27

  本文關鍵詞：miR-638慢病毒載體的構建及其對MAPK14的靶向調控作用

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【摘要】：目的構建miR-638慢病毒過表達載體,探討其對MAPK14基因的靶向調控作用。方法分別構建pSicoR-miR-638及pMIR-Report-MAPK14過表達載體,應用雙熒光素酶報告基因活性、Western blot及實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法驗證miR-638與MAPK14的靶向調控關系。結果經(jīng)PCR、酶切及測序結果證明成功構建了pSicoR-miR-638及pMIR-ReportMAPK14重組質粒,并通過實驗證實miR-638過表達明能顯抑制MAPK14的蛋白及mRNA表達(P0.05);抑制miR-638的表達,則MAPK14蛋白及mRNA的表達水平明顯上調(P0.05)。結論成功構建pSicoR-miR-638慢病毒載體,并證實其可通過靶向作用于MAPK14-3’UTR的特異序列而直接抑制MAPK14基因的表達。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學檢驗學院;寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院醫(yī)學實驗中心;
【關鍵詞】： microRNA miR- MAPK
【基金】：國家自然科學基金(31160494) 教育部“新世紀優(yōu)秀人才支持計劃”項目(NCET11-11023) 中國博士后特別基金項目(2012T50834) 中國博士后基金項目(20110491554)
【分類號】：R392
【正文快照】： microRNA(miRNA)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類長約為18~25個核苷酸的內源性非編碼單鏈小分子RNA,其表達具有高度的組織特異性、保守性和時序性;miRNA主要通過堿基互補匹配原則,結合mRNA的非編碼區(qū)導致靶mRNA降解,也可通過與靶mRNA3’UTR結合,阻遏基因轉錄后的翻譯過程[1],從而參與細胞

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：693345