本文關(guān)鍵詞：慢性腱病模型大鼠肌腱干細胞體外成脂和成肌腱的分化能力

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【摘要】：背景:慢性腱病是一種常見的肌腱退行性病變,好發(fā)于運動員以及肌腱過度勞損的人群。由于慢性腱病的發(fā)病機制尚未闡明,臨床上還缺乏有效的治療手段。目的:體外研究比較慢性腱病大鼠和正常大鼠來源肌腱干細胞成脂、成肌腱分化能力。方法:從慢性腱病大鼠以及正常大鼠髕腱中分離培養(yǎng)原代肌腱干細胞,傳代培養(yǎng)至第3代,體外觀察細胞形態(tài)學(xué)變化。將兩種來源肌腱干細胞(P3)單層培養(yǎng)至細胞融合,分為2組,成脂誘導(dǎo)組用成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng),對照組用基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)。成脂誘導(dǎo)分化21 d后,將兩種來源肌腱干細胞的成脂誘導(dǎo)組和對照組分別行油紅O染色定量分析。實時熒光定量PCR檢測各組細胞成脂性基因C/EBPα和PPARγ2的m RNA的表達。將兩種來源的肌腱干細胞體外單層培養(yǎng)至70%-80%融合時,行實時熒光定量PCR檢測慢性腱病來源肌腱干細胞以及正常肌腱干細胞成肌腱相關(guān)基因Col1a1,Scx,Tnmd和Dcn的m RNA的表達。結(jié)果與結(jié)論:肌腱干細胞體外培養(yǎng)至第3代時,正常肌腱來源的肌腱干細胞保持細長紡錘形的典型的干細胞形態(tài),而慢性腱病來源的肌腱干細胞雖然形態(tài)發(fā)生改變,但仍保持紡錘形形態(tài)。肌腱干細胞(P3)體外成脂誘導(dǎo)分化21 d后,慢性腱病來源的肌腱干細胞胞體變大、變圓,可見大量油紅O染色陽性的細胞,油紅O染色陽性率顯著高于正常大鼠(P=0.004)。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,慢性腱病大鼠來源肌腱干細胞的成脂性基因(C/EBPα和PPARγ2)m RNA的表達均顯著高于正常大鼠(P=0.004),肌腱特異性基因Col1a1,Scx,Tnmd以及Dcn m RNA表達量均明顯低于正常大鼠(P=0.009)。說明與正常大鼠來源的肌腱干細胞相比,慢性腱病來源的肌腱干細胞體外成肌腱分化的能力減弱,而成脂分化的能力增強,此結(jié)果為進一步揭示慢性腱病發(fā)病機制提供了細胞生物學(xué)依據(jù)。
【作者單位】： 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科;東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院無錫分院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 組織工程 干細胞 肌腱病 大鼠 分化 肌腱干細胞 慢性腱病 髕腱 成脂分化 成肌腱分化 油紅O染色 實時定量PCR 成脂性基因(C/EBPα、PPARγ) 肌腱特異性基因(Cola、Scx、Tnmd以及Dcn) 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金項目(81201422) 江蘇省自然科學(xué)基金青年基金項目(BK2012334) 東南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費“創(chuàng)新基金”項目(3290002401) 中國博士后基金資助(2012M520983) 國家大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃(1210286090) 江蘇省“六大人才高峰”資助項目(2013-WSW-054)~~
【分類號】：R-332
【正文快照】： 族,副主任醫(yī)師,東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科,碩士。主要研究方向為運動系統(tǒng)軟組織附著點部位的組織結(jié)構(gòu),病理學(xué)特征及生物力學(xué)特性相關(guān)性的研究。通訊作者:芮云峰,副主任醫(yī)師,碩士生導(dǎo)師。東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院骨科,江蘇省南京市2100002014.45.019[http://www.crter.org](2014)4

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