本文關(guān)鍵詞：貴州省蚋類攜帶病原體和宿主種類的篩查

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【摘要】：目的:(1)利用DNA條形碼(DNA barcode,線粒體細胞色素C氧化酶亞基I基因5'端)和形態(tài)學特征鑒定貴州省蚋類物種;(2)以線粒體細胞色素b基因(Cytb)的特定區(qū)域及乙型肝炎基因序列為遺傳標記,對貴州省蚋類攜帶的病原體及宿主種類進行篩查。方法:(1)標本來源:利用車載式捕蟲網(wǎng)于2014年7-9月在貴州省7縣(雷山、榕江、三穗、江口、德江、關(guān)嶺、開陽)采集蚋類標本,每個地區(qū)設(shè)1-2個采集點;(2)標本處理:常規(guī)固定并形態(tài)學初步鑒定,解剖鏡下切尾器制片;(3)蚋類物種鑒定:提取雌蚋DNA,PCR擴增蚋類COI基因并測序,使用生命數(shù)據(jù)條形碼系統(tǒng)及系統(tǒng)發(fā)育方法進行分析,并結(jié)合形態(tài)學特征,鑒定蚋類物種;(4)蚋類病原體種類篩查:PCR分別擴增原蟲Cytb基因及乙肝病毒基因并測序,根據(jù)在Gen Bank中的比對結(jié)果判斷病原體種類;(5)蚋類吸血宿主種類篩查:PCR擴增哺乳動物和鳥類Cytb基因并測序,根據(jù)在Gen Bank中的比對結(jié)果判斷宿主種類。結(jié)果:(1)共采獲昆蟲標本49,622頭,除1頭雙尾綱昆蟲外,均屬昆蟲綱,分類為8目145科,其中鞘翅目(Coleoptera)38科,雙翅目(Diptera)37科,鱗翅目(Lepidoptera)30科,膜翅目(Hymenoptera)29科,半翅目(Hemiptera)7科,蜻蜓目(Odonata)2科,堾翅目(Plecoptera)1科,脈翅目(Neuroptera)1科。(2)采獲蚋類標本702頭,其中雌蚋531頭,雄蚋171頭,PCR擴增雌蚋COI基因后,獲得521頭的DNA條形碼序列,經(jīng)鑒定包括1屬23種。(3)初步確定劃分蚋屬下蚋種的Kimura 2-parameter(K2P)距離閾值為4%,利用該閾值、生命數(shù)據(jù)條形碼系統(tǒng)、系統(tǒng)發(fā)育分析及形態(tài)學特征鑒定麻子繩蚋(Simulium asakoae)153頭,五條蚋(Simulium quinquestriatum)156頭,雙齒蚋(Simulium bidentatum)97頭,昌隆蚋(Simulium chamlongi)9頭,裝飾短蚋(Simulium ornatum)2頭,紅頭厭蚋(Simulium erythrocephala)1頭,待定種(Simulium spp.)17種103頭。(4)原蟲類病原體的PCR擴增結(jié)果均為陰性。(5)在1頭雌蚋(五條蚋)中擴增出乙型肝病毒基因序列。(6)在4頭雌蚋中篩查到1例人Cytb基因序列(蚋種為麻子繩蚋),2例鳥類Cytb基因序列(蚋種為雙齒蚋和待定種),1例為家山羊Cytb基因序列(蚋種為雙齒蚋)。結(jié)論:(1)共鑒定蚋種23種,包括麻子繩蚋、五條蚋、雙齒蚋、昌隆蚋、裝飾短蚋和紅頭厭蚋等6個已知種,以及17個待定種,其中,麻子繩蚋為貴州省蚋類新記錄;(2)未篩查到蚋類攜帶的原蟲類病原體;(3)在1頭五條蚋中發(fā)現(xiàn)與乙型肝炎病毒基因序列一致的序列;(4)貴州省蚋類吸血宿主種類包括人、家山羊及鳥類;(5)貴州省分布的麻子繩蚋、雙齒蚋及1待定種為吸血蚋種。
【關(guān)鍵詞】：蚋科 病原體 宿主偏好 遺傳標記 DNA條形碼 系統(tǒng)發(fā)育分析
【學位授予單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R384.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文略縮詞表9-10
• 0 引言10-13
• 1 材料與方法13-25
• 2 結(jié)果25-42
• 3 討論42-44
• 4 結(jié)論44-45
• 參考文獻45-49
• 綜述49-59
• 參考文獻55-59
• 作者簡歷59-60
• 致謝60-61
• 學位論文數(shù)據(jù)集61

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本文編號：636147