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高表達(dá)FGFR4細(xì)胞株的建立及其生物活性分析

發(fā)布時(shí)間:2017-08-03 22:23

  本文關(guān)鍵詞:高表達(dá)FGFR4細(xì)胞株的建立及其生物活性分析


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【摘要】:目的構(gòu)建FGFR4高表達(dá)細(xì)胞,研究FGFR4對(duì)細(xì)胞增殖能力的影響及相關(guān)蛋白活化機(jī)制,為研究以FGFR4為靶點(diǎn)的藥物提供細(xì)胞模型。方法構(gòu)建FGFR4真核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,篩選穩(wěn)定表達(dá)FGFR4細(xì)胞株,免疫印跡和免疫熒光分析FGFR4表達(dá)水平,細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)FGFR4高表達(dá)細(xì)胞的增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測(cè)FGFR4對(duì)細(xì)胞周期的影響,同時(shí)對(duì)ERK1/2磷酸化水平進(jìn)行免疫印跡分析。結(jié)果在相同培養(yǎng)環(huán)境下,HEK293-FGFR4細(xì)胞同HEK293-pcDNA細(xì)胞相比,其增殖能力提高。周期分析表明,FGFR4使G0/G1期降低,促進(jìn)細(xì)胞的增殖。同時(shí),對(duì)MAPK信號(hào)通路進(jìn)行了初步分析,發(fā)現(xiàn)FGFR4蛋白可以引起ERK1/2的磷酸化,從而導(dǎo)致MAPK/ERK1/2通路的激活,說(shuō)明FGFR4可激活MAPK信號(hào)通路。結(jié)論成功構(gòu)建了FGFR4高表達(dá)細(xì)胞株,為篩選以FGFR4為靶標(biāo)的抗腫瘤藥物奠定了前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥物研究所;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR) HEK 高表達(dá) 細(xì)胞增殖
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81202495,81101725) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(No.xjj2011092)~~
【分類號(hào)】:R346
【正文快照】: 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4(fibroblast growthfactor receptor 4,FGFR4)屬于FGFR家族成之一,其結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域、疏水跨膜區(qū)和細(xì)胞質(zhì)含有酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。FGFR4有廣泛的生物學(xué)功能,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、存活、遷移和分化的能力[1-7],FGFR4信號(hào)通路的激活在腫瘤

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 Nan Su;Min Jin;Lin Chen;;Role of FGF/FGFR signaling in skeletal development and homeostasis: learning from mouse models[J];Bone Research;2014年01期

2 Bao-Li Li;Fang Xiao;Wen-Chao Lu;Yu-Yun Sun;Jin Zhu;Jian Li;;Discovery and synthesis of N~2,N~4-substitued-cycloalkyl[d]pyrimidine-2,4-diamine analogs: The first examples of small-molecular FGFR-1 activator[J];Chinese Chemical Letters;2014年07期

3 蘇毓;劉風(fēng)玲;;成纖維生長(zhǎng)因子受體4與胃癌發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年19期

4 朱明月;李孟森;;甲胎蛋白:治療肝癌的新靶點(diǎn)[J];海南醫(yī)學(xué);2014年01期

5 楊建;劉梅;劉炎;;脊椎動(dòng)物FGFs受體蛋白的進(jìn)化分析[J];南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年06期

6 杜培娟;;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體抑制劑的研究進(jìn)展[J];化學(xué)與生物工程;2014年12期

7 羅鎮(zhèn)明;龔隆財(cái);楊雁青;李雨蒙;黃建芳;宋其芳;王宏;;靶向bFGF與FGFR1Ⅲc結(jié)合位點(diǎn)的單克隆抗體制備及其生物學(xué)活性研究[J];免疫學(xué)雜志;2015年02期

8 丁v,

本文編號(hào):616614


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