霍亂弧菌分子分型和溯源技術(shù)ISSR-PCR的改進
本文關(guān)鍵詞:霍亂弧菌分子分型和溯源技術(shù)ISSR-PCR的改進
更多相關(guān)文章: 霍亂弧菌 簡單序列重復區(qū)間聚合酶鏈反應 分子分型 遺傳溯源
【摘要】:目的對簡單序列重復區(qū)間聚合酶鏈反應(ISSR-PCR)進行改進和優(yōu)化,以建立一種改進型霍亂弧菌分子分型和遺傳溯源技術(shù)。方法通過設計、篩選優(yōu)良擴增引物和優(yōu)化反應體系對ISSR-PCR進行技術(shù)改進,并選擇75株霍亂弧菌作為方法學的分型測試樣品進行實驗驗證。結(jié)果經(jīng)篩選以引物ISSR_GA5分型效果最佳。對ISSR-PCR實驗條件進行優(yōu)化,確定最佳反應體系:Mg2+濃度為2.0mmol/L,dNTPs濃度為0.3mmol/L、引物濃度為1.2μmol/L。采用改進型ISSR-PCR技術(shù)能正確區(qū)分霍亂弧菌菌株中的產(chǎn)毒株(流行株)和非產(chǎn)毒株(非流行株)、O1群/O139群和非O1/非O139群以及本地株和外地株。結(jié)論建立的改進型ISSR-PCR技術(shù)分型效率高,為我國衛(wèi)生檢疫和疾控部門開展霍亂等重要傳染病的防控和疫情溯源提供了新的、簡便實用的技術(shù)方法。
【作者單位】: 珠海出入境檢驗檢疫局國際旅行衛(wèi)生保健中心;南方醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學學院生物統(tǒng)計學系;
【關(guān)鍵詞】: 霍亂弧菌 簡單序列重復區(qū)間聚合酶鏈反應 分子分型 遺傳溯源
【基金】:國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(No.2009IK206)
【分類號】:R378.3
【正文快照】: 霍亂弧菌是天然存在于水體和魚類中的致病菌,可引起急性腹瀉、嘔吐,瀉吐頻繁、量大,為米泔水樣,易導致患者脫水、電解質(zhì)紊亂,嚴重者可致休克、酸中毒,如不及時搶救,病死率甚高[1]。該病來勢迅猛,傳播迅速,易引起世界大流行,因此被確定為國際檢疫傳染病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的統(tǒng)
【共引文獻】
中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
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【相似文獻】
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4 記者 葉明e,
本文編號:605706
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