本文關鍵詞：下丘腦可塑性變在束縛應激致HPA軸活性和行為學改變中的作用

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【摘要】：研究背景:應激是機體對刺激所做出的生理和心理反應,可導致內(nèi)分泌和行為改變。下丘腦--垂體--腎上腺(hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA)軸在應激反應中起主導作用,但調(diào)控HPA軸興奮性的機理迄今仍不十分清楚。目前的研究認為,下丘腦可塑性變化在HPA軸的激活和維持中起關鍵作用,研究下丘腦可塑性變化對防治應激繼發(fā)性損害有重要價值。神經(jīng)可塑性變化主要是指外界或內(nèi)部的各種刺激因子和神經(jīng)內(nèi)分泌反應長時間作用于神經(jīng)細胞后導致的改變,分為結構可塑性和功能可塑性變。而腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)還有生長相關蛋白(Growth associated protein-43,GAP-43)均被視為是神經(jīng)結構可塑性的分子標志物,與神經(jīng)細胞的再生和增殖相關,用于標記與量化可塑性變化的程度還有范圍。功能可塑性主要表現(xiàn)在動作電位和突觸傳遞效能增強,即突觸傳遞長時程增強(long-term potentiation,LTP),減弱則表現(xiàn)為長時程抑制(long—term depression,LTD)。N—甲基—D—天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受體NR2B亞基以及α—氨基—3—羥基—5—甲基—4—異惡唑丙酸(α—amino—3—hydroxy—5—methyl—4—isoxazole—propionic acid,AMPA)受體Glu R2亞基在調(diào)節(jié)LTP/LTD中發(fā)揮核心作用,可作為研究功能可塑性改變的指標。本研究在成功建立起大鼠束縛應激模型基礎上,通過行為學實驗、酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法、免疫組織化學法和蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot,WB),研究束縛應激對大鼠行為學、血漿CRH濃度、下丘腦形態(tài)、神經(jīng)細胞結構可塑性和功能可塑性標記蛋白的影響,及CRH1受體(corticotropinreleasing hormone type 1 receptor,CRH1R)特異性阻滯劑CP-154526的干預效果。以期闡明應激后下丘腦可塑性變化與HPA軸興奮性增高和行為變化的相關性。結果:1行為學實驗可見,經(jīng)過慢性束縛應激后,大鼠一般狀況表現(xiàn)為活動減少、反抗性降低、反應遲}、食欲減退、體重增長減緩。曠場試驗可見7天束縛應激后,大鼠穿格次數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)增高,呈現(xiàn)亢奮狀態(tài)。經(jīng)過慢性束縛應激后,大鼠穿格次數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)則明顯降低,呈現(xiàn)抑郁狀態(tài)。同時強迫游泳和懸尾實驗中慢性束縛應激大鼠不動時間增加。慢性束縛大鼠糖水偏好率下降,反映了大鼠的快感缺乏。而CP-154526干預可以大大提高慢性應激抑郁大鼠的體重增加量,改善慢性應激大鼠的行為學表現(xiàn)和精神癥狀,表現(xiàn)了其對應激不良反應的治療作用。ELISA實驗提示慢性應激下大鼠血漿CRH濃度升高,HPA軸興奮性增高,而CP-154526可拮抗CRH作用,降低HPA軸活性。2慢性束縛應激大鼠下丘腦HE染色結果提示下丘腦細胞結構發(fā)生了明顯改變。與對照組比較,神經(jīng)細胞胞體邊界清晰,核染變大,核膜清晰,核仁一個,細胞膜及核膜完整、清晰,慢性應激下丘腦發(fā)生了結構可塑性變化。免疫組化實驗觀測到慢性應激導致下丘腦BDNF、GAP-43表達增加,同時導致谷氨酸受體GluR2亞基表達減少,NR2B亞基表達則增加;CP-154526干預后可阻滯應激大鼠下丘腦BDNF、GAP-43蛋白、NR2B亞基表達上調(diào),阻滯應激大鼠下丘腦GluR2亞基的表達下調(diào)。結論:應激后下丘腦BDNF與GAP-43表達增高,參與結構可塑性變化。NMDA受體NR2B亞基增加,而AMPA受體Glu R2亞基減少,導致LTP/LTD改變,引起功能可塑性變化。下丘腦可塑性變化和HPA軸活性增高及行為學改變相關。下丘腦可塑性變化誘導HPA軸活性增加及抑郁樣行為,而CP-154526通過阻斷CRH1R,拮抗下丘腦可塑性變化,可抑制HPA軸活性增加和改善類似抑郁癥狀,最終逆轉慢性應激的病理進程,起著拮抗應激的作用。
【關鍵詞】：應激 下丘腦 促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素 可塑性 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 生長相關蛋白 受體 谷氨酸
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R338.27
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 英文摘要5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 SD大鼠應激模型的建立及行為學 與HPA軸活性檢測12-26
• 2.1 引言12-13
• 2.2 材料與方法13-19
• 2.3 結果19-22
• 2.4 討論22-25
• 2.5 小結25-26
• 第三章 束縛應激大鼠下丘腦可塑性相關蛋白的檢測26-46
• 3.1 引言26-27
• 3.2 材料與方法27-35
• 3.3 結果35-41
• 3.4 討論41-44
• 3.5 小結44-46
• 全文結論46-47
• 參考文獻47-54
• 文獻綜述 應激下丘腦可塑性變化的相關機制研究進展54-61
• 參考文獻58-61
• 碩士就讀期間撰寫及發(fā)表的論文61-62
• 致謝62

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何明利;興奮性氨基酸、興奮性氨基酸受體及其對HPA軸的影響[J];國外醫(yī)學.內(nèi)分泌學分冊;1996年04期

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本文編號：555550