本文關(guān)鍵詞：大鼠Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究

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【摘要】：目的改良細(xì)胞分離方法,得到高純度的原代Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞(ATⅠ)并進(jìn)行培養(yǎng),初步觀察其生物學(xué)特性。方法采用SPF級SD大鼠,通過酶消化法、IgG貼壁法和免疫磁珠法獲得高純度ATⅠ并進(jìn)行培養(yǎng),采用臺盼藍(lán)染色計算細(xì)胞活力,免疫熒光DAPI法鑒定細(xì)胞純度和表型,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長規(guī)律,計數(shù)法繪制細(xì)胞生長曲線。結(jié)果每只體重120g左右的SD大鼠可獲得(2.1±0.5)×106個ATⅠ,細(xì)胞活力為93.8%±1.6%,細(xì)胞純度為91.0%±0.6%。培養(yǎng)3d后細(xì)胞完全黏附、伸展,培養(yǎng)7d后匯合形成單層扁平狀。免疫熒光檢測顯示,培養(yǎng)的原代細(xì)胞水通道蛋白5(AQP5)和小窩蛋白1(Cav-1)呈陽性表達(dá),表面活性蛋白C前體(pro-SPC)呈陰性表達(dá)。獲取的ATⅠ可在體外增殖,生長曲線顯示原代ATⅠ在對數(shù)增長期的倍增時間約為66h。結(jié)論改良細(xì)胞分離方法可以得到高純度的ATⅠ,培養(yǎng)后細(xì)胞生長良好,可為研究以ATⅠ損傷為特征的肺部疾病提供可靠的體外模型。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所第四研究室 創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肺泡上皮細(xì)胞 Ⅰ型 細(xì)胞分離 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)項(xiàng)目(2012CB518104)~~
【分類號】：R329.28
【正文快照】： 肺泡上皮(alveolar epithelium)由兩種細(xì)胞組成,即Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞(alveolar typeⅠcell,IATⅠ)和Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞(alveolar typeⅡcell,ATⅡ)。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為ATⅡ是肺泡上皮中具有生物學(xué)活性的細(xì)胞,而終末分化的ATⅠ只是被動地參與氣血屏障的形成,不增殖,也不具有可塑性[1

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蘭超;李海娜;李莉;王金柱;李璐;劉蘭萍;狄敏;;甲潑尼龍聯(lián)合氨溴索對急性百草枯中毒家豬肺損傷的影響研究[J];中國全科醫(yī)學(xué);2014年17期

2 馮丹;徐家麗;姚尚龍;;洛沙坦通過抑制NF-κB減輕大鼠機(jī)械通氣所致肺損傷[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 洪牮;缺血性心肌纖維化中聚合膠原對促進(jìn)小鼠成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的相關(guān)信號通路的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

2 武雅琴;辛伐他汀緩解缺血再灌注肺損傷的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

3 施昀;蛇床子素對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 李勇;急性肺損傷微環(huán)境對大鼠原代Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞增殖、表型的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

5 王金柱;機(jī)械通氣對百草枯中毒家豬急性肺損傷的影響[D];鄭州大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 夏前明;肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)pH的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);1997年04期

2 盧曉曄,黃中新,王檣;小鼠肺泡發(fā)育與肺泡上皮細(xì)胞分化的電鏡觀察[J];解剖學(xué)研究;2000年01期

3 袁毅君,張敏,馬綱;“呼吸生理”中兩個概念的辨異[J];生物學(xué)教學(xué);2002年08期

4 李勇;杜娟;余靜;王海燕;岳彩黎;曾靈;蔣建新;;大鼠Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年05期

5 周彩存;肺泡鈉離子和液體的吸收[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年03期

6 于永霞，，劉福記，蘇學(xué)忠;云南樹

本文編號：539239