本文關(guān)鍵詞：人外周血來(lái)源的過(guò)度生長(zhǎng)內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：與內(nèi)皮干細(xì)胞相比,外周血來(lái)源的過(guò)度生長(zhǎng)內(nèi)皮細(xì)胞(blood outgrowth endothelial cells,BOECs)富含血管新生和細(xì)胞黏附所需的蛋白,生物學(xué)特性更像內(nèi)皮細(xì)胞;同時(shí)它克服了成熟的人臍血內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)擴(kuò)增量少和表型易發(fā)生改變的缺點(diǎn),成為一種研究血管異常相關(guān)性疾病的新工具。本研究旨在建立從人外周血中體外培養(yǎng)、擴(kuò)增BOECs,并進(jìn)行鑒定的方法。采集外周血,梯度離心獲得單個(gè)核細(xì)胞,接種于膠原鋪板的細(xì)胞培養(yǎng)皿上,EGM-2培養(yǎng)4周。觀察BOECs的形態(tài)學(xué)特征,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面抗原表達(dá)。血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)多聚體分析BOECs上清v WF多聚體分布,熒光共聚焦顯微鏡鑒定細(xì)胞內(nèi)v WF的貯存及v WF的刺激分泌。結(jié)果表明,體外誘導(dǎo)培養(yǎng)4周左右,出現(xiàn)克隆性生長(zhǎng)的細(xì)胞集落,BOECs呈現(xiàn)"鋪路石"樣外觀。經(jīng)過(guò)3周左右的擴(kuò)增后,過(guò)度生長(zhǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)CD31、CD34、EPCR陽(yáng)性,CD14、CD45、CD133陰性。收集BOECs上清,進(jìn)行v WF多聚體分析,與正常血漿相比v WF多聚體分布無(wú)差異。在熒光共聚焦顯微鏡下觀察,BOECs內(nèi)貯存v WF,加入佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后,細(xì)胞內(nèi)v WF增加,細(xì)胞表面可見(jiàn)v WF絲狀結(jié)構(gòu)。結(jié)論:本研究運(yùn)用該實(shí)驗(yàn)方法在國(guó)內(nèi)首次實(shí)現(xiàn)了人BOECs的體外培養(yǎng)、擴(kuò)增及鑒定。該方法可以為血管性血友病病人發(fā)病機(jī)制的探討提供天然的細(xì)胞模型,并可能為病人基因治療提供新工具。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院、江蘇省血液研究所、衛(wèi)生部血栓與止血重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、血液學(xué)協(xié)同創(chuàng)新中心;江蘇省蘇北人民醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】： 外周血 過(guò)度生長(zhǎng)內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞表型 血管性血友病因子
【基金】：2012年度江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(832) 江蘇省科教興衛(wèi)工程-臨床醫(yī)學(xué)中心(ZX201102)資助
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： Isolation,Culture and Characte rization of Outgrowth Endothe lialCe lls from the Human Pe riphe ral BloodYIN Jie1,2▲,MA Zhen-Ni1▲,ZHAO Xiao-Juan1,RUAN Chang-Geng1*1Jiangsu Institute of Hematology,Key Laboratory of Thrombosis and Hemostasis of Ministry

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王治榮,相原薰,小林洋;內(nèi)皮細(xì)胞和血管舒縮[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1991年03期

2 章崇杰,魏大鵬,趙宗蓉,劉杰,張平;促炎刺激物對(duì)淋巴細(xì)胞粘附和穿透內(nèi)皮細(xì)胞的影響[J];上海免疫學(xué)雜志;1997年02期

3 徐冬;補(bǔ)體活化對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用[J];中國(guó)心血管雜志;2000年03期

4 呂寧;;內(nèi)皮細(xì)胞的功能及其研究進(jìn)展[J];科技信息;2011年12期

5 高而威;內(nèi)皮細(xì)胞可由受體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)胰島素[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1986年02期

6 張利華，李方勇，王耀發(fā);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)二甲亞砜對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞周期的影響[J];華東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1996年03期

7 王正榮,王玲;血管壁剪切應(yīng)力系統(tǒng)及用于內(nèi)皮細(xì)胞與白細(xì)胞粘附的研究[J];生物物理學(xué)報(bào);1997年02期

8 楊自力,王正國(guó),朱佩芳,白濤,吳恒義;一氧化氮損傷內(nèi)皮細(xì)胞的機(jī)制研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;1998年04期

9 劉韌,肖南,田昆侖,刁有芳;炎癥介質(zhì)通過(guò)延遲嗜中性粒細(xì)胞凋亡促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷[J];實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào);2002年03期

10 金惠銘;癌基因?qū)?nèi)皮細(xì)胞的調(diào)控[J];微循環(huán)技術(shù)雜志;1993年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 應(yīng)大君;陳衛(wèi)軍;周丁華;;內(nèi)皮細(xì)胞機(jī)械感受功能的實(shí)驗(yàn)研究[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

2 林萍章;PualJ.Pearson;RaymondCartier;KazuhiroHashimoto;HartzellV.Schaff;;內(nèi)膜再生過(guò)程中,內(nèi)皮細(xì)胞之反應(yīng)[A];海峽兩岸電子顯微學(xué)討論會(huì)論文專(zhuān)集[C];1991年

3 盛民主;朱涵能;袁鋒;王利華;周兆年;;內(nèi)皮細(xì)胞的電壓依賴(lài)性鉀離子流[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

4 鄭翌;沈恂;;H_2O_2在內(nèi)皮細(xì)胞中引起胞內(nèi)鈣信號(hào)的機(jī)制研究[A];第六屆全國(guó)自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議和海峽兩岸自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

5 黃華;王貴學(xué);秦建;石軼松;危當(dāng)恒;宋關(guān)斌;蔡紹皙;;低密度脂蛋白對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞與四型膠原粘附的影響[A];第十次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2006年

6 劉波;Ying-xiao Wang;;擾動(dòng)流作用下內(nèi)皮細(xì)胞Rac1蛋白的極性分布變化[A];第十屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第十二屆全國(guó)生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2012年

7 孫瑞娟;;切應(yīng)力誘導(dǎo)培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞小凹蛋白的移位[A];第七屆北京青年科技論文評(píng)選獲獎(jiǎng)?wù)撐募痆C];2003年

8 周思怡;馬維清;顏嘉宏;樓迎統(tǒng);;內(nèi)皮細(xì)胞中自由基與一氧化氮之互動(dòng)[A];第五屆全國(guó)自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

9 李曉寧;樊瑜波;;內(nèi)皮細(xì)胞力學(xué)實(shí)驗(yàn)圖象定量分析系統(tǒng)[A];第七屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

10 朱波;薛耀明;高方;周琳;曹瑛;陸雯;連欣;;高葡萄糖通過(guò)調(diào)節(jié)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性抑制內(nèi)皮細(xì)胞SOD活性[A];2010中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)內(nèi)分泌代謝科醫(yī)師分會(huì)年會(huì)論文匯編[C];2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 邱彥;Ox-LDL誘導(dǎo)單核/內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)系統(tǒng)VEGF上調(diào)及其促通透性升高的作用機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

2 劉浩宇;Exendin-4經(jīng)eNOS通路促使內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮釋放[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

3 張利佳;小G蛋白R(shí)ac1介導(dǎo)硫化氫促血管新生作用的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

4 孫銘娟;Angioarrestin的克隆表達(dá)及其生物學(xué)作用機(jī)理的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 劉水;浮膠共培養(yǎng)中平滑肌細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞血管形成及功能的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

2 楊小明;體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞與血液有形成份粘附動(dòng)力學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2001年

3 常小飛;機(jī)械力刺激下大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2000年

4 陳沖;微接觸印刷法制備膠原蛋白濃度梯度及其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞粘附與遷移的研究[D];重慶大學(xué);2009年

5 劉運(yùn)來(lái);人臍血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞間通訊及其分泌蛋白質(zhì)檢測(cè)的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

6 趙瑛;ZNF580在TGF-β誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)eNOS中的作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

7 楊書(shū)強(qiáng);聯(lián)合種植肌成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建組織工程心臟瓣膜的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2007年

8 高雪;環(huán)境因子對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞影響及相關(guān)磷脂圖譜的建立[D];天津大學(xué);2007年

9 黃潔;外源性GM3對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞功能與結(jié)構(gòu)的影響[D];南昌大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：人外周血來(lái)源的過(guò)度生長(zhǎng)內(nèi)皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：497192