本文關鍵詞：日本腦炎病毒NS3蛋白酶活性檢測及抑制劑高通量篩選方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是單股正鏈RNA病毒,全基因組僅含有一個開放閱讀框,編碼一條多聚蛋白前體,病毒編碼的NS3蛋白酶在JEV多聚蛋白加工過程中起著重要作用,是重要的藥物靶標。通過PCR擴增了NS2BH-NS3蛋白酶的編碼區(qū),構(gòu)建了原核表達質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3),經(jīng)IPTG誘導得到可溶性的NS3蛋白酶,用鎳親和層析方法進行了純化。建立了基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移的NS3蛋白酶活性檢測方法,并確定了最佳的反應條件,對113個化合物進行了篩選,發(fā)現(xiàn)其中兩個化合物對JEV NS3蛋白酶具有一定的抑制活性。本研究為JEV NS3蛋白酶的活性研究及抑制劑篩選提供了一種操作方便、成本低廉的方法。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室;華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院;
【關鍵詞】： 日本腦炎病毒 NS蛋白酶 可溶性表達 酶活性 抑制劑高通量篩選
【基金】：國家自然科學基金(No.30800831) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(No.2011AA10A212)資助~~
【分類號】：R373
【正文快照】： 日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是由蚊蟲媒介傳播的嗜神經(jīng)病毒,為黃病毒科黃病毒屬成員之一。JEV主要在亞洲流行并造成較大的危害[1-2],其感染豬后導致母豬流產(chǎn),產(chǎn)死胎、木乃伊胎等繁殖障礙,公豬多發(fā)生睪丸炎,給我國的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失[3]。同時JEV可

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  本文關鍵詞：日本腦炎病毒NS3蛋白酶活性檢測及抑制劑高通量篩選方法的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：458731