Mac-1(CD11b/CD18)是位于白細胞表面參與機體防御功能及免疫反應的重要粘附分子。它由α(CD11b)和β(CD18)兩個亞基以非共價鍵的方式締合成異二聚體；編碼CD11b和CD18的基因在人分別位于第16號和第21號染色體上。Mac-1具有兩種主要功能：一是與活化的內(nèi)皮細胞表面上的ICAM-1高親和力的粘附，介導白細胞的游走與滲出。二是介導白細胞對iC₃b調(diào)理的微生物或免疫復合物的細胞毒功能。 迄今為止，Mac-1粘附功能的研究已經(jīng)相當深入，但對于Mac-1的分布、貯存、轉(zhuǎn)位和變構(gòu)的過程，雖然文獻報告很多，但由于方法學的限制，尚未見有在一個活細胞內(nèi)對其全過程進行動態(tài)實時的定位定量的研究。以往文獻中研究Mac-1的分布、貯存、轉(zhuǎn)位的方法，主要采用的是抗體標記Mac-1，用流式細胞術(shù)測定或免疫組化技術(shù)顯微鏡下直接觀察Mac-1的細胞內(nèi)分布，但其缺點是不可能在單細胞、活細胞連續(xù)地觀察，如果要研究在細胞內(nèi)的走向則還需要增大細胞表面通透性，這就難免干擾了細胞的生理狀態(tài)。作為一種標記物，GFP(綠色熒光蛋白)具有發(fā)光不需要底物、穩(wěn)定、無毒性、分子量小、形成...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3pcDnb一CFP融合蛋白表達質(zhì)粒的酶切鑒定PECFp一NIHindlll/KPnl雙酶切ABCDEF

碩士論文Mac一1一FP肚合蛋白在CHO細施結(jié)果與討論FP融合蛋白表達質(zhì)粒的篩選和鑒定白表達質(zhì)粒pCDIlb一BFp分別用Hindlll單酶切與HindllP一Nl表達載體用Hindlll和KPnl雙酶切，1%的瓊脂糖凝膠大小分別為:pCDllb一BFP一Hindlll單酶切8.....

圖5pcDllb一cFP穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細胞4周時的熒光顯微鏡下成像

士論文Mac小FP觸合蛋會在CRO如鵝穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細胞4周時的熒光顯微鏡下成像白表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CHo細胞后，高濃度G418(1000林歲ml)篩野生型CHO細胞全部死亡，轉(zhuǎn)染pCD1lb一CFP的CHO細的轉(zhuǎn)染細胞繼續(xù)用高濃度G418篩選3周，熒光顯微鏡激發(fā)能夠發(fā)出青色熒光的轉(zhuǎn)染....

圖5pcDllb一cFP穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細胞4周時的熒光顯微鏡下成像

大學碩士論文Mac小FP觸合蛋會在CRO如鵝中的b一CFP穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細胞4周時的熒光顯微鏡下成像融合蛋白表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染CHo細胞后，高濃度G418(1000林歲ml)篩選細對照組野生型CHO細胞全部死亡，轉(zhuǎn)染pCD1lb一CFP的CHO細胞未死的轉(zhuǎn)染細胞繼續(xù)用高濃度G418篩選....

圖7cHo一cDnb一CFP細胞再轉(zhuǎn)染pYFI，一CD18后熒光顯微鏡下成像

Mac小FP觸合蛋合在CH細胞再轉(zhuǎn)染pYFp一CD18后熒光顯微鏡下融合蛋白表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到已獲得的CHo一CD0nm和492nm的熒光顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)m和492nm激發(fā)光下發(fā)出青色和黃色熒光(定表達CDIlb一CFP和YFP一CD18融合蛋白的C細胞)。

本文編號：3973771