目的:作為造血干細胞的新來源,臍血以其獨特的優(yōu)勢已廣泛應用于移植治療、生物免疫治療、基因治療等領(lǐng)域。但由于單份臍血的采集量低,不足以滿足成人移植的需要,長期以來,研究者們一直在探索臍血干/祖細胞的有效分離、擴增的方法。本課題旨在尋求一種簡便、高效、實用的臍血干/祖細胞的分離方法,并且對分離后的細胞進行體外擴增,來考察分離后的臍血干/祖細胞的增殖能力,探索擴增后最佳的應用時機;同時,比較有血清與無血清方法體外擴增臍血干/祖細胞的異同,探究無血清方法臨床應用的可能性。 方法:體外分離并培養(yǎng)臍血單個核細胞(MNC),計數(shù)MNC總數(shù)、流式細胞儀檢測CD34+細胞含量、混合集落生成單位(CFU-mix)培養(yǎng)觀察集落形成能力,驗證臍血干/祖細胞分離和擴增的效果。 1.將自行配制的比重為1.064g/L的蔗聚糖-泛影葡胺(Ficoll-hypaque)分離液與傳統(tǒng)的比重為1.077g/L淋巴細胞分離液密度梯度分離臍血,檢測上述指標,比較分離效果;2.用上述兩種分離液分離的臍血MNC進行添加細胞因子(IL-3、SCF、GM-CSF)的為期三周的體外擴增,并對擴增后的細胞進行上述指標的檢測,觀察每周臍血...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1：1.064組新鮮臍血CFU-mix（×200）

圖2：1.077組新鮮臍血CFU-mix（×200）

圖3：1.064組擴增7天時CFU-mix（×200）

圖4：1.064組擴增14天時CFU-mix（×200）

本文編號：3911790