空腸彎曲菌PEB1的B細胞免疫優(yōu)勢表位的鑒定及保護效果的評價
發(fā)布時間:2024-01-31 04:09
目的利用表位預測分析技術篩選空腸彎曲菌(C. jejuni)黏附蛋白PEB1的B細胞免疫優(yōu)勢表位,并評價其免疫保護效果。方法采用氨基酸步移策略,合成18 mer氨基酸重疊肽段。ELISA系統(tǒng)篩選鑒定PEB1的B細胞免疫優(yōu)勢表位。采用KLH偶聯(lián)免疫優(yōu)勢表位肽免疫BALB/c小鼠,ELISA測定優(yōu)勢表位肽誘導的IgG抗體效價。末次免疫后7 d,經(jīng)口灌胃感染C. jejuni 11168,在感染后的28 d,定量檢測感染攻毒后各組小鼠的空腸組織C. jejuni的定植量以及q RT-PCR技術檢測炎性細胞因子TNF-α的相對表達水平。通過HL-60細胞調理吞噬實驗測定表位肽誘導產(chǎn)生抗體所介導的調理吞噬殺傷功能。免疫B細胞缺失小鼠,感染攻毒后檢測腸組織C. jejuni的定植量。結果 PEB155-72aa、PEB197-114aa、PEB1211-228aa均能與PEB1抗血清產(chǎn)生強烈IgG抗體反應。抗PEB155-72aa、抗PEB197-114aa和PEB1211-228aa血清均能與重組的PEB1產(chǎn)生較強的抗原抗體反應。與CFA/IFA組相比,免疫PEB155-72aa、PEB197-...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實驗動物及分組
1.2 實驗試劑
1.3 肽段的合成與偶聯(lián)
1.4 動物的免疫
1.5 抗體檢測
1.6 動物感染和空腸組織C.jejuni的定植檢測
1.7 實時熒光定量聚合酶鏈反應 (q RT-PCR) 檢測
1.8 抗體介導的調理吞噬作用
1.9 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 免疫PEB1重組蛋白對小鼠感染C.jejuni后的空
2.2 B細胞免疫優(yōu)勢表位篩選及鑒定
2.3 PEB1免疫優(yōu)勢表位發(fā)揮抗C.jejuni感染的免疫保護作用
2.4 PEB1免疫優(yōu)勢表位介導的調理吞噬作用
2.5 PEB1免疫優(yōu)勢表位介導的免疫保護依賴B細胞
3 討論
本文編號:3890942
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1 材料與方法
1.1 實驗動物及分組
1.2 實驗試劑
1.3 肽段的合成與偶聯(lián)
1.4 動物的免疫
1.5 抗體檢測
1.6 動物感染和空腸組織C.jejuni的定植檢測
1.7 實時熒光定量聚合酶鏈反應 (q RT-PCR) 檢測
1.8 抗體介導的調理吞噬作用
1.9 統(tǒng)計學分析
2 結果
2.1 免疫PEB1重組蛋白對小鼠感染C.jejuni后的空
2.2 B細胞免疫優(yōu)勢表位篩選及鑒定
2.3 PEB1免疫優(yōu)勢表位發(fā)揮抗C.jejuni感染的免疫保護作用
2.4 PEB1免疫優(yōu)勢表位介導的調理吞噬作用
2.5 PEB1免疫優(yōu)勢表位介導的免疫保護依賴B細胞
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