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白血病細胞系來源的樹突狀細胞的誘導、鑒定及凍存方法的研究

發(fā)布時間:2023-04-17 04:34
  目的 誘導K562細胞系向樹突狀細胞轉(zhuǎn)化,尋找一種快速、簡便、高效的獲取DC方法。 方法 1.分組 取對數(shù)生長期的K562細胞,以5×105/ml的濃度接種至24孔板中,并于實驗組中分別加入①A23187使終濃度為250ng/ml ②A23187 180ng/ml和rhGM-CSF500U/ml ③rhGM-CSF1000U/ml、rhIL-4500U/ml及rhTNF-α 200U/ml,37℃飽和濕度,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天左右,隔天半量換液并給實驗孔補加半量誘導因子。2.形態(tài)學觀察 通過倒置顯微鏡觀察誘導細胞形態(tài)學的動態(tài)變化并攝像。3.DC表型鑒定 運用流式細胞術(shù)檢測誘導K562-DC表面分子CD1a、HLA-DR、CD54、CD83、CD80及CD86表達率,以了解誘導前后及不同方法誘導K562表面分子的差異。4.功能檢測MTT法檢測DC對異基因淋巴細胞的刺激增殖能力及其致敏T細胞對靶細胞的殺傷作用。 結(jié)果 上述三種因子組合均能誘導K562細胞系向成熟DC轉(zhuǎn)化,且含A23187的兩組72小時獲得DC樣細胞的數(shù)量明顯多于不含A23187的...

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
第一章 A23187快速誘導K562細胞分化成樹突狀細胞的研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
第二章 白血病細胞來源樹突狀細胞低溫凍存方法的研究
    中文摘要
    英文摘要
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
    綜述
    參考文獻
致謝



本文編號:3792579

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