目的:建立一種快速、大量培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細胞(bMSCs)及快速、大量成骨誘導培養(yǎng)人bMSCs成為成骨細胞的方法,以滿足組織工程技術(shù)治療大段骨缺損對細胞數(shù)量和質(zhì)量的需要。 方法:1. 利用微載體培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細胞:將普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的第3代人bMSCs分為兩部分,一部分1×107個采用微載體培養(yǎng),另一部分繼續(xù)采用普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng),分別觀察細胞增殖情況,作出生長曲線,比較兩種方法細胞增殖速度 (細胞擴增倍數(shù)/培養(yǎng)天數(shù))。 2. 利用微載體法成骨誘導培養(yǎng)bMSCs:將普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的第3代人bMSCs采用攪拌式生物反應器和微載體成骨誘導培養(yǎng),觀察細胞增殖情況,作出生長曲線,與普通成骨誘導培養(yǎng)法比較細胞增殖速度。分別于培養(yǎng)的第2,4,6,8,10,12,14d檢測誘導細胞的ALP活性,并與普通成骨誘導方法進行對比,作出ALP活性曲線。最后進行細胞ALP染色、Ⅰ型膠原、骨鈣素的免疫組化染色,觀察所培養(yǎng)細胞的成骨細胞表型的表達。 結(jié)果:1. 利用微載體培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細胞:微載體法接種24h后約87.1%的bMSCs細胞貼附于微載體并鋪展,3d后生長加速,約8⁹天后細胞...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

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論文正文 人骨髓間充質(zhì)干細胞的微載體培養(yǎng)及成骨誘導培養(yǎng)
    前 言
    第一部分 人骨髓間充質(zhì)干細胞的微載體培養(yǎng)
        前 言
        材料和方法
        結(jié) 果
        討 論
        參考文獻
    第二部分 人骨髓間充質(zhì)干細胞的微載體成骨誘導培養(yǎng)
        前 言
        材料和方法
        結(jié) 果
        討 論
        參考文獻
    全文結(jié)論
    致 謝
    照 片
文獻綜述一 生物反應器在組織工程學中的應用及其前景
    參考文獻
文獻綜述二 骨組織工程中的種子細胞
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3789110