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miR1-2誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化過程中的Wnt/β-catenin信號(hào)通路

發(fā)布時(shí)間:2022-12-24 12:37
  背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有向心肌細(xì)胞分化的潛能,但其分化率較低,且其分化機(jī)制尚不完全明確。目的:探討miR1-2在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化成心肌樣細(xì)胞中的作用,揭示此過程中涉及的信號(hào)通路。方法:用miR1-2和5-氮雜胞嘧啶處理小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。通過q PCR檢測(cè)心肌細(xì)胞標(biāo)志物GATA4在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,并通過測(cè)定該信號(hào)通路的上游蛋白評(píng)價(jià)Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活性。結(jié)果與結(jié)論:(1)miR1-2模擬物轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞24 h后,miR1-2在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)顯著增加。miR-2模擬物處理48 h后,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的凋亡率無顯著差異;(2)轉(zhuǎn)染miR1-2模擬物48 h后,與對(duì)照組相比,GATA4的表達(dá)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)顯著增加,處理72 h后,這些基因在miR1-2組中的表達(dá)顯著高于5-氮雜胞嘧啶組和對(duì)照組;(3)與miR1-2-mimics-NC相比,用miR1-2模擬物處理后,β-catenin和Wnt11的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)均顯著增加,而添加Wnt/β-catenin信號(hào)通路抑制劑LGK-974后,β-cate... 

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
文章快速閱讀:
文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器與試劑
    1.4 方法
        1.4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離和體外培養(yǎng)[21]
        1.4.2骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.4.3 細(xì)胞凋亡測(cè)定
        1.4.4 Real-time PCR檢測(cè)GATA4、Wnt11和β-catenin的mRNA表達(dá)
        1.4.5 Western blot法檢測(cè)GATA4蛋白的表達(dá)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 5-氮雜胞嘧啶和miR1-2處理的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中miR1-2的表達(dá)水平
    2.2 5-氮雜胞嘧啶和miR-1模擬物對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 miR1-2的高度表達(dá)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中心臟特異性基因的表達(dá)
    2.4 高表達(dá)miR1-2激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路
    2.5 miR1-2通過Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)激活誘導(dǎo)心肌細(xì)胞分化
3 討論Discussion


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]Wnt和Notch通路在老齡個(gè)體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨中的調(diào)控[J]. 張建康,衛(wèi)俊俊,唐曌隆,余云波,敬偉.  國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
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本文編號(hào):3726155

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