發(fā)布時間：2022-12-23 06:23

　　朊病毒是一類能引起人或動物神經(jīng)退行性疾病的感染因子。蛋白質(zhì)錯誤折疊循環(huán)擴(kuò)增（Protein misfolding cy-clic amplification,PMCA）是一種常見的朊病毒體外擴(kuò)增技術(shù)。白藜蘆醇是一種具有較高研究價值的植物抗菌素。為了建立SMB-S15細(xì)胞中朊病毒的PMCA體系,并探索PMCA技術(shù)在評價白藜蘆醇抗朊病毒作用的意義,本研究以朊病毒感染細(xì)胞系SMB-S15細(xì)胞勻漿為種子,健康小鼠腦組織勻漿為底物,建立PMCA技術(shù)平臺。將不同濃度的白藜蘆醇導(dǎo)入PMCA體系,通過Western Blot方法檢測PMCA產(chǎn)物中異常朊蛋白（PrPSc）的生成和變化。結(jié)果顯示:SMB-S15細(xì)胞中PrPSc可以在建立的PMCA體系有效地復(fù)制。新生成的PrPSc分子的糖基化特征與原始細(xì)胞中的PrPSc不同,其雙糖基化分子比例明顯增加。同時也有別于羊瘙癢因子139A和ME7感染小鼠腦組織中的PrPSc分子。加入白藜蘆醇后,PrPSc在PMCA體系中的復(fù)制明顯被抑制,呈現(xiàn)出劑量依賴效應(yīng),其EC50約為4.616μM。這些結(jié)果表明:SMB-S15細(xì)胞中的PrPSc可以通過PMCA大量擴(kuò)增,建立... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1材料
    2底物及種子的制備
    3 PMCA
    4蛋白酶K消化
    5免疫印跡法
結(jié)果
    1細(xì)胞朊病毒PMCA的建立
    2白藜蘆醇對細(xì)胞朊病毒在PMCA體系中復(fù)制的影響
討論



本文編號：3724894