目的探討Ndfip1過(guò)表達(dá)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞SH-SY5Y鐵超載損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法以SH-SY5Y細(xì)胞為細(xì)胞模型,并成功構(gòu)建Ndfip1質(zhì)粒。應(yīng)用Ndfip1質(zhì)粒和空質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,建立實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。MTT法檢測(cè)不同濃度FeSO₄作用下,SH-SY5Y細(xì)胞存活率的變化,確定鐵超載濃度;Ndfip1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,確定轉(zhuǎn)染效率;Ndfip1質(zhì)粒和空質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染SH-SY5Y細(xì)胞,MTT法檢測(cè)2組細(xì)胞存活率的變化;應(yīng)用Calcein AM法處理細(xì)胞,熒光顯微鏡下觀察2組細(xì)胞的熒光強(qiáng)度,以確定細(xì)胞內(nèi)鐵離子的含量;熒光分光光度計(jì)檢測(cè)2組細(xì)胞的熒光強(qiáng)度變化,以確定細(xì)胞鐵攝入能力的改變。結(jié)果隨著FeSO₄濃度增加,SH-SY5Y細(xì)胞存活率逐漸降低。200μmol/L FeSO₄可導(dǎo)致SH-SY5Y細(xì)胞存活率明顯下降。Ndfip1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染可明顯增加SH-SY5Y細(xì)胞Ndfip1蛋白表達(dá)量,提高SH-SY5Y細(xì)胞鐵超載損傷后的存活率,減少細(xì)胞內(nèi)鐵離子含量及細(xì)胞對(duì)鐵離子的攝入。結(jié)論鐵超載對(duì)神經(jīng)細(xì)胞造成損傷,導(dǎo)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1細(xì)胞及主要試劑
    1.2方法
        1.2.1SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2鐵超載濃度測(cè)定
        1.2.3細(xì)胞轉(zhuǎn)染及分組
        1.2.4MTT法檢測(cè)SH-SY5Y細(xì)胞存活率
        1.2.5蛋白印跡檢測(cè)Ndfip1蛋白表達(dá)量
        1.2.6Calcein AM法檢測(cè)鐵離子
        1.2.7熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)鐵離子含量
        1.2.8熒光分光光度計(jì)檢測(cè)細(xì)胞攝入鐵的變化
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度FeSO4對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞存活率的影響
    2.2 Ndfip1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率的測(cè)定
    2.3 Ndfip1過(guò)表達(dá)對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞存活率的影響
    2.4 Ndfip1過(guò)表達(dá)對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞鐵離子含量的影響
    2.5 Ndfip1過(guò)表達(dá)對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞鐵攝入能力的影響
3 討論
    3.1 鐵超載對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷作用
    3.2 Ndfip1對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用
    3.3 Ndfip1的保護(hù)作用機(jī)制



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