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人滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)方法的建立與HBsAg進入滋養(yǎng)層細胞的初步研究

發(fā)布時間:2022-07-13 09:48
  目的HBV可經(jīng)胎盤引起胎兒感染,此即HBV宮內(nèi)傳播。有關HBV宮內(nèi)傳播機制,國內(nèi)外報道較少。自1992年以來,我室進行了系統(tǒng)研究,提出了HBV宮內(nèi)感染經(jīng)血源性和細胞源性兩條途徑傳播的假說。但需要大量的研究去證實。胎盤滋養(yǎng)層細胞作為胎盤屏障的第一層細胞,直接與母親血液接觸,可能是HBV侵入胎盤的關鍵部位。但HBV是如何進入滋養(yǎng)層細胞的?其確切機理國內(nèi)外尚未見報道。體內(nèi)研究初步顯示,HBsAg陽性孕婦胎盤滋養(yǎng)層細胞上存在HBsAg-抗HBs復合物,同時存在IgG FcR。綜合目前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀,本文擬進行體外HBV模擬感染培養(yǎng)的人胎盤滋養(yǎng)層細胞的實驗研究。 方法 取妊娠6~10wk、發(fā)育正常、HBV感染指標全陰性的新鮮流產(chǎn)胎盤組織,挑取絨毛,用胰蛋白酶(0.25%)-DNaseⅠ(0.15U/ml)聯(lián)合消化,經(jīng)多種方法反復純化,獲取純度較高的人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞。用流式細胞儀檢測培養(yǎng)的滋養(yǎng)層細胞表面IgG FcR的表達情況。將狀態(tài)良好的對數(shù)生長期人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞分為6組,分別加入HBsAg-anti-HBs復合物,熱滅活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均陽性血清和高滴度an... 

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分: 人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞的體外培養(yǎng)
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分: 乙型肝炎病毒抗表面抗原抗體IgG的分離純化
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分: HBsAg進入人胎盤滋養(yǎng)層細胞過程中抗體依賴作用的實驗研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
參考文獻
致謝
綜述
參考文獻
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本文編號:3659822

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