攜帶人腎素基因及血管緊張素原基因的轉基因小鼠的初步建立
發(fā)布時間:2022-07-12 14:46
原發(fā)性高血壓是一種血壓不明原因升高的多基因遺傳病。已證明腎素、血管緊張素系統(tǒng)(RAS)與高血壓的發(fā)生發(fā)展關系密切。為探討原發(fā)性高血壓的分子遺傳機制,我們進行了攜帶人腎素基因及血管緊張素原基因轉基因小鼠的初步研究。堿裂解法提取克隆人腎素基因及血管緊張素原基因的質粒,PEG8000純化。限制性酶切圖譜分析證實這兩個基因的結構是完整的,符合轉基因實驗要求。玻璃粉洗脫法對上述基因進一步純化。用微注射法將其導入小鼠受精卵的雄性原核。注射后成活的卵移植到假孕母鼠輸卵管。共移植34只鼠,其中11只懷孕,產(chǎn)仔40只。提取鼠尾DNA作Southern雜交分析。結果表明4只鼠有人腎素基因整合,整合率為10%。血管緊張素原基因末檢測到。取轉基因陽性鼠腎臟提取總RNA,用人腎素cDNA作探針進行Northern雜交,結果顯示,2只轉基因陽性鼠腎臟有人腎素mRNA合成。本實驗為建立攜帶人腎素基因及血管緊張素原基因的轉基因高血壓鼠奠定了基礎。該工作仍在進行中。
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 文獻綜述
一、轉基因動物—高血壓研究中的一個新動物模型
二、轉基因小鼠在心血管研究中的應用
第二部分 質粒phRNTM15及phANTM14的擴增、純化及限制性內(nèi)切酶圖譜分析
一、材料
二、方法
三、結果與分析
四、討論
五、圖版
第三部分 攜帶人腎素及血管緊張素原基因的轉基因小鼠的初步建立
一、材料
二、方法
三、結果與分析
四、討論
第四部分 結論
圖版
參考文獻
致謝
本文編號:3659320
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 文獻綜述
一、轉基因動物—高血壓研究中的一個新動物模型
二、轉基因小鼠在心血管研究中的應用
第二部分 質粒phRNTM15及phANTM14的擴增、純化及限制性內(nèi)切酶圖譜分析
一、材料
二、方法
三、結果與分析
四、討論
五、圖版
第三部分 攜帶人腎素及血管緊張素原基因的轉基因小鼠的初步建立
一、材料
二、方法
三、結果與分析
四、討論
第四部分 結論
圖版
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