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Ghrelin通過ERK1/2磷酸化上調(diào)HSP70發(fā)揮細胞保護作用

發(fā)布時間:2022-02-20 06:51
  目的:探討細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2(extracellcular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)信號轉(zhuǎn)導通路在ghrelin上調(diào)熱休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)表達及抑制氧化應激誘導PC12細胞凋亡中的作用。方法:采用硝普鈉(sodium nitroprusside, SNP)誘導PC12細胞構(gòu)建氧化應激損傷模型;實驗分為SNP損傷組(0.5 mmol/L SNP分別孵育PC12細胞6 h、12 h、18 h和24 h),ghrelin預處理組(加SNP前30 min給予100 nmol/L ghrelin),HSP70抑制劑組[ghrelin處理前60 min加入10μmol/L槲皮素(quercetin)],ERK阻斷劑組(ghrelin處理前60 min加入ERK1/2抑制劑PD98059)和對照組(只加入等量的培養(yǎng)液);利用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率,通過Western blot和免疫細胞化學染色法檢測蛋白表達的變化。結(jié)果:(1)與對照組比較, SNP損傷組PC12細胞的凋亡率顯著增加(P<... 

【文章來源】:中國病理生理雜志. 2019,35(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
材 料 和 方 法
    1 實驗對象
    2 主要試劑
    3 主要方法
        3.1 PC12細胞培養(yǎng)
        3.2 PC12細胞凋亡模型的建立及給藥方案
        3.3 Western blot實驗
        3.4 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率
        3.5 免疫細胞化學染色法
    4 統(tǒng)計學處理
結(jié) 果
    1 Ghrelin對NO誘導的PC12凋亡的影響
    2 Ghrelin對PC12細胞HSP70表達的影響
    3 HSP70抑制劑quercetin消減ghrelin的抗凋亡效應
    4 ERK1/2磷酸化對ghrelin誘導的HSP70高表達的影響
討 論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]米諾環(huán)素通過調(diào)控PI3K/Akt通路抑制硝普鈉誘導的PC12細胞凋亡[J]. 吳秀勤,楊煉紅,鐘健強,葉晉豪,劉淑瓊.  中國病理生理雜志. 2013(04)



本文編號:3634500

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