發(fā)布時間：2022-01-01 09:47

　　完整的內皮屏障對維持正常的血液循環(huán)和組織器官的正常功能具有十分重要的作用。內皮細胞通透性升高是炎性反應的重要特點,是微血管功能障礙的主要表現,也是引起組織缺氧和細胞代謝障礙的重要原因之一。內皮細胞通透性改變的機制及其調控十分復雜,涉及眾多炎癥介質、細胞因子、受體及信號傳導系統(tǒng)。迄今為止,雖然國內外對此進行了大量研究,對內皮細胞通透性調控機制也取得了較為深入的認識,但其確切機理尚未完全闡明。而且,目前的研究多采用細胞生物學、分子生物學方法,利用蛋白質組學方法研究內皮細胞通透性的相關蛋白質,國內外尚鮮見報道。由于內毒素（LPS）是常見的致炎物質,組織胺則是內源性炎癥介質,兩者均可導致微血管內皮細胞通透性升高,但兩者作用存在較大差異。本實驗首先研究內毒素血癥時大鼠肺、腸組織微血管通透性的改變及內毒素和組織胺對體外培養(yǎng)臍靜脈內皮細胞通透性的影響,并在此基礎上,應用雙向電泳、圖象分析和質譜分析等蛋白質組學方法研究通透性相關的蛋白質組改變,探討LPS和組織胺作用下體外培養(yǎng)內皮細胞蛋白表達的差異性。主要結果及結論如下: 1.在大鼠內毒素血癥模型上,5 mg/kg和10 mg/kg LPS均可造... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

內皮細胞接種后96h，細胞形態(tài)呈梭形或鵝卵石樣，10x10

子免疫組化鑒定，95%以上的內皮細胞胞漿內存在棕即姍因子陽性細胞，并且可見核分裂相，10X40。內皮細胞通透性的影響均可引起內皮細胞通透性增加，并呈劑量依賴性10一mofL/組織胺可以顯著增加內皮細胞的LPS和組織胺對單層內皮細胞通透速率的影響(下3，LPS(pg/ml)110100組.558士0一0250.613士0.0730.669士0.087*0.588士0.1090.05，**尸<.001

用AO一EB染色后，活細胞的胞核呈綠色網狀結構，胞漿有紅一橙色顆粒;凋亡細胞可見細胞收縮變圓，整個細胞呈均勻的綠色;壞死細胞則呈明亮的紅色。對照組細胞生長正常，無凋亡和壞死細胞出現(圖5)。1pgLPS和10pgLPs處理后可見個別凋亡細胞(圖6，7)，而100協(xié)gLPS處理后凋亡細胞增多，并可出現壞死細胞(圖8)。10.7mouL組織胺作用下內皮細胞基本正常(圖9)，10一6molL/組織胺可使細胞收縮變圓，出現凋亡早期表現(圖10)，而10一smolL/組織胺作用后則可見有凋亡晚期或壞死細胞出現(圖11)。圖5對照組細胞經AO一EB染色，可見細胞生長正常，圖6無凋亡或壞死細胞。lp創(chuàng)mlLPS處理內皮細胞后

【參考文獻】：
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本文編號：3562119