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端粒酶逆轉(zhuǎn)錄功能區(qū)基因的表達(dá)、純化和抗體制備

發(fā)布時(shí)間:2021-12-22 04:13
  端粒是真核細(xì)胞染色體末端的特殊結(jié)構(gòu),由呈串聯(lián)排列的重復(fù)亞單位DNA片段和端粒結(jié)合蛋白構(gòu)成,保護(hù)染色體免于降解、末端重合、重排、和丟失,維持染色體的穩(wěn)定性和完整性。人端粒的重復(fù)亞單位序列為TTAGGG,長(zhǎng)約5-20kb。體細(xì)胞每傳代一次,端?s短50-200bp,縮短至一定程度時(shí)(2-4kb)細(xì)胞衰老或死亡。 與正常細(xì)胞相比腫瘤衍生細(xì)胞系和生殖細(xì)胞的端粒并不隨細(xì)胞分裂進(jìn)行性縮短,提示細(xì)胞內(nèi)存在將端粒片段加至端粒末端的酶。Greider和Blackburn驗(yàn)證了端粒酶的存在,之后證實(shí)端粒酶是含RNA(端粒合成的模板)的核糖核蛋白,為RNA依賴性的DNA聚合酶,具有反轉(zhuǎn)錄活性。端粒酶可能在腫瘤無限增殖的維持中起重要作用。盡管現(xiàn)在端粒酶的激活機(jī)制還不甚明了,但可以確定端粒酶的激活能持續(xù)合成端粒并加到染色體末端,阻止其縮短,在癌癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用。它已成為一種新的腫瘤標(biāo)記物及抗癌靶點(diǎn) 近來人端粒酶組分RNA和相關(guān)蛋白(TP1和hTRT)的分離、研究及其全基因的成功克隆,為圍繞端粒酶而進(jìn)行的機(jī)制研究、端粒酶結(jié)構(gòu)研究、端粒酶抑制劑研究、及其與臨床診斷和治療的相關(guān)研究等等提供了... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 hTERT逆轉(zhuǎn)錄功能區(qū)基因的克隆表達(dá)和鑒定
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第二章 hTRT包涵體的溶解性分析
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第三章 hTRT融合蛋白的純化和復(fù)性
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第四章 hTRT融合蛋白多克隆抗體的制備
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]端粒酶活性在腫瘤診治中的價(jià)值[J]. 易鐵男,周云峰.  現(xiàn)代診斷與治療. 2001(01)
[2]HeLa細(xì)胞端粒酶的分離純化及其蛋白質(zhì)組分的研究[J]. 周俊宜,羅超權(quán).  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2000(04)
[3]端粒酶抑制劑與腫瘤治療[J]. 徐萍.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè)). 1998(04)



本文編號(hào):3545737

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