本文關鍵詞：慢性應激對大鼠海馬膠質細胞的不對稱性影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過建立慢性不可預見溫和應激大鼠模型，考察①慢性應激所致大鼠學習記憶行為損傷是否在移除應激源之后得到自然恢復；②慢性應激下海馬膠質細胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達是否會發(fā)生改變；③研究慢性應激條件下，膠質細胞中的GFAP和EAAT2蛋白在大鼠海馬三個亞區(qū)的表達情況，確定慢性應激對海馬的損傷是否存在靶點。④研究慢性應激對膠質細胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達在大鼠海馬是否存在不對稱性影響，并證明以往我們在研究中所發(fā)現(xiàn)的，慢性應激對海馬的損傷具有右側偏側化的特點。⑤研究大鼠海馬中膠質細胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達是否會隨著應激源的去除而得到恢復，進一步探討慢性應激造成的海馬損傷的修復機制問題。 方法：將雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分配到對照組、應激組和恢復組，建立慢性不可預見性應激模型，恢復組大鼠移除應激源后給予5周的自然恢復時間。應激模型和恢復模型結束后進行行為測試，考察大鼠海馬空間學習和記憶功能的變化，行為實驗包括曠場實驗、水迷宮實驗和Y迷宮實驗三部分。行為實驗結束后對慢性應激組和對照組大鼠進行蛋白免疫印跡實驗，，檢測慢性應激后大鼠海馬星形膠質細胞結構和功能相關蛋白（GFAP和EAAT2）的表達水平是否發(fā)生變化。隨后對三組大鼠海馬組織進行免疫組化實驗，分別考察在海馬三個亞區(qū)中慢性應激是否對星形膠質細胞具有不對稱性作用，并進一步檢測移除應激35天后這種改變是否得到逆轉。 結果：①慢性應激導致海馬空間記憶和行為功能受損，并在應激移除后得到一定程度的自然恢復，表現(xiàn)為水迷宮實驗中恢復組大鼠在學習階段逃離潛伏期顯著地低于應激組和對照組(P0.01)，Y迷宮實驗中應激組大鼠并未表現(xiàn)出對新異臂的偏好，恢復組與對照組均表現(xiàn)出新異臂穿梭次數(shù)百分比顯著高于其他兩臂（P0.05）；②大鼠海馬星形膠質細胞中的GFAP和EAAT2兩種蛋白在慢性應激中的表達發(fā)生改變，GFAP表達顯著上調（P0.05），EAAT2表達出現(xiàn)下降（P0.05）；③在慢性應激后，海馬不同亞區(qū)星形膠質細胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白表達水平在DG區(qū)變化不明顯，在CA1和CA3區(qū)有明顯改變，其中CA3區(qū)最為顯著；④慢性應激過程中，大鼠海馬星形膠質細胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白表達在CA1和CA3區(qū)存在不對稱性，尤其以右側改變明顯；⑤移除應激源后自然恢復35天后，慢性應激導致的星形膠質細胞結構和功能的變化出現(xiàn)部分的恢復，但是并未完全達到正常水平。 結論：①大鼠對慢性應激導致海馬空間記憶和行為受損具有一定的自我恢復能力。②星形膠質細胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白的改變是慢性應激導致記憶、行為損傷的重要作用機制之一。③大鼠海馬的CA1和CA3區(qū)，尤其是CA3區(qū)，可能是慢性應激損傷的重要靶點。④慢性應激對海馬星形膠質細胞的損傷存在右側偏側化的特點。⑤慢性應激一旦造成海馬結構損傷，其修復速度比學習記憶行為等功能的恢復要慢，具體機制則需要進一步探討。
【關鍵詞】：慢行不可預見性溫和應激 不對稱性 星形膠質細胞 海馬 恢復
【學位授予單位】：浙江理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 縮略語13-14
• 引言14-15
• 1 文獻綜述15-25
• 1.1 慢性應激15-17
• 1.1.1 應激與慢性應激15-16
• 1.1.2 抑郁與慢性應激16-17
• 1.2 腦不對稱性17-18
• 1.3 海馬18-20
• 1.3.1 海馬與慢性應激18-19
• 1.3.2 海馬的不對稱性19-20
• 1.4 星形膠質細胞20-23
• 1.4.1 星形膠質細胞與慢性應激21-22
• 1.4.2 膠質細胞的主要相關蛋白22-23
• 1.5 慢性應激的恢復23-25
• 2 研究設計25-29
• 2.1 研究目的25
• 2.2 研究意義25-26
• 2.2.1 理論意義25-26
• 2.2.2 實踐意義26
• 2.3 研究內容26-27
• 2.4 研究假設27
• 2.5 研究創(chuàng)新27
• 2.6 研究方法27-29
• 3 研究一：慢性應激對大鼠海馬功能的影響29-42
• 3.1 材料和方法29-31
• 3.1.1 動物及分組29
• 3.1.2 慢性不可預見性溫和應激模型29-30
• 3.1.3 設備及儀器30
• 3.1.4 藥品及試劑30-31
• 3.2 動物行為實驗31-32
• 3.2.1 曠場實驗31
• 3.2.2 Morris 水迷宮實驗31-32
• 3.2.3 Y 迷宮實驗32
• 3.3 統(tǒng)計方法32-33
• 3.4 結果33-37
• 3.4.1 慢性應激對大鼠曠場實驗的影響33-34
• 3.4.2 慢性應激對大鼠水迷宮實驗的影響34-36
• 3.4.3 慢性應激對大鼠 Y 迷宮實驗的影響36-37
• 3.5 討論37-41
• 3.5.1 慢性不可預見性溫和應激及恢復模型37-38
• 3.5.2 慢性應激及其恢復與大鼠空間認知能力38-41
• 3.6 小結41-42
• 4 研究二：慢性應激導致大鼠海馬不同亞區(qū)中星形膠質細胞中 GFAP 和 EAAT2 蛋白表達水平的不對稱性改變42-61
• 4.1 材料和方法42-46
• 4.1.1 動物及分組42
• 4.1.2 心臟灌注42
• 4.1.3 蛋白定量42
• 4.1.4 Western blot42-43
• 4.1.5 組織處理43
• 4.1.6 免疫組化43
• 4.1.7 儀器及設備43-44
• 4.1.8 藥品及試劑44-46
• 4.1.9 圖像采集46
• 4.1.10 統(tǒng)計方法46
• 4.2 結果46-57
• 4.2.1 蛋白免疫印跡結果46-48
• 4.2.2 免疫組化中蛋白表達的變化48-57
• 4.3 討論57-61
• 4.3.1 慢性應激對膠質纖維酸性蛋白 GFAP 表達的影響57-59
• 4.3.2 興奮性氨基酸轉運蛋白 EAAT2 表達的影響59-60
• 4.3.3 小結60-61
• 5 總討論61-63
• 6 結論與展望63-65
• 6.1 研究結論63
• 6.2 展望與不足63-65
• 參考文獻65-77
• 附錄一 Western blot77-78
• 附錄二 組織處理78-79
• 附錄三 免疫組化 EnVision 二步法79-80
• 致謝80

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Expression of fibroblast growth factor-2 and fibroblast growth factor receptor-1 protein in the hippocampus in rats exhibiting chronic stress-induced depression[J];Neural Regeneration Research;2011年13期

  本文關鍵詞：慢性應激對大鼠海馬膠質細胞的不對稱性影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：353592