發(fā)布時間：2021-12-11 20:46

　　目的:構(gòu)建YTH N6甲基腺苷RNA結(jié)合蛋白1(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein 1,Ythdf1)的基因敲除小鼠,研究其在小鼠精子發(fā)生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9敲除技術(shù)及原核注射技術(shù)構(gòu)建Ythdf1基因敲除小鼠模型,通過免疫熒光、HE染色對敲除小鼠睪丸及附睪進行形態(tài)學(xué)分析,通過交配實驗進行生殖力測試,研究Ythdf1基因?qū)π坌孕∈缶影l(fā)生的影響。結(jié)果:RT-PCR結(jié)果顯示,Ythdf1在1～8周齡雄鼠睪丸中均有表達;成功構(gòu)建Ythdf1基因敲除小鼠;成年敲除小鼠精子發(fā)生、附睪及生育力均無異常。結(jié)論:在正常飼養(yǎng)情況下,敲除Ythdf1基因?qū)π坌孕∈缶影l(fā)生無影響。

【文章來源】： 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019,39(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 構(gòu)建敲除小鼠模型
        1.2.2 敲除小鼠基因型鑒定
        1.2.3 敲除小鼠睪丸HE染色
        1.2.4 敲除小鼠睪丸免疫組化及熒光染色
2 結(jié)果
    2.1 Ythdf1基因表達情況
    2.2 構(gòu)建Ythdf1敲除小鼠
    2.3 Ythdf1敲除小鼠表型分析
    2.4 Ythdf1敲除小鼠生育能力分析
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