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人胎盤來(lái)源的造血干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-11-27 09:48
  目的建立人胎盤來(lái)源的造血干細(xì)胞(placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs)和間充質(zhì)干細(xì)胞(placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs)的分離方法,并進(jìn)行鑒定和組分分析。方法選取10份新生健康嬰兒胎盤組織,采用機(jī)械破碎法聯(lián)合磁珠分選法分離h P-HSCs,胎盤絨毛膜組織塊貼壁法分離hP-MSCs,利用形態(tài)學(xué)觀察、集落培養(yǎng)、流式細(xì)胞術(shù)等進(jìn)行鑒定。結(jié)果 hP-HSCs:分離后有核細(xì)胞數(shù)(total nucleated cell number,TNC)為(11. 82±2. 46)×108個(gè),TNC回收率≥80%;細(xì)胞活性為(99. 7±0. 3)%;細(xì)胞表面抗體CD34+CD45dim表達(dá)率為(8. 69±0. 36)%,CD34+總數(shù)為(108. 0±6. 48)×106個(gè);集落形成總數(shù)為(1. 88±1. 07)×106。hP-MSCs:凍存細(xì)胞總數(shù)為(40. 78±9. 35)×10

【文章來(lái)源】:中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2019,32(01)CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 胎盤組織
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 h P-HSCs的分離
        1.3.1 機(jī)械破碎法
        1.3.2 磁珠分選
    1.4 h P-MSCs的分離制備
    1.5 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
    1.6 h P-MSCs的傳代培養(yǎng)
    1.7 細(xì)胞表面抗體的檢測(cè)
        1.7.1 分選后的CD34+細(xì)胞的流式檢測(cè)
        1.7.2 hP-MSCs的流式檢測(cè)
    1.8 h P-MSCs成脂、成骨誘導(dǎo)分化
2 結(jié)果
    2.1 h P-HSCs的分離
    2.2 h P-MSCs的分離
    2.3 h P-HSCs的集落培養(yǎng)
    2.4 磁珠分選后CD34+細(xì)胞和h P-MSCs的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果
    2.5 h P-MSCs的成脂、成骨誘導(dǎo)分化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]3種組織來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞體外成骨能力的比較[J]. 趙剛,劉微微,高偉瑋,馬潔.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2017(10)
[2]人臍帶非酶解法培養(yǎng)MSCs的方法建立[J]. 李素萍,王震,王超,王永珍,周學(xué)勇,吳學(xué)忠,楊宏友,呂蓉.  中國(guó)輸血雜志. 2017(08)
[3]人胎盤絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng):組織塊法的優(yōu)化[J]. 金宇林,吳潔瑩,陸琰,陳勁松,李發(fā)濤,唐婕,劉東,梁綺華,李焱,湯雪薇,謝閨娥,吳韶清.  中國(guó)組織工程研究. 2017(21)
[4]二次貼壁法高效制備人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞[J]. 蘆慧穎,杜文敬,劉春香,孟慶雪,付寅生,石佳寧,張婷婷,張怡.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2017(06)
[5]不同培養(yǎng)方法對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[J]. 劉奉,蔣祥林,劉明明.  中國(guó)組織工程研究. 2016(28)
[6]人臍帶和胎盤來(lái)源的干細(xì)胞分離鑒定及其組份分析[J]. 周勝利,鄭超,蘇建強(qiáng),戚媛紅,司正凱.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2015(06)
[7]胎盤組織及血液中含有豐富的造血干/祖細(xì)胞[J]. 周勝利,宋劍秋,旭日.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2002(02)
[8]深低溫凍存十六年后臍血造血干細(xì)胞活性的檢測(cè)[J]. 時(shí)慶,侯懷水,鞠秀麗,李棟,沈柏均.  中華血液學(xué)雜志. 2008 (08)

碩士論文
[1]胎盤來(lái)源造血干細(xì)胞分離提取和體外擴(kuò)增研究[D]. 李猛.中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2017



本文編號(hào):3522030

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