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脂多糖通過TLR4參與小鼠脂肪性肝損傷模型炎癥反應觀察

發(fā)布時間:2021-11-21 06:48
  目的:研究在小鼠脂肪性肝損傷中脂多糖(LPS)參與肝臟炎癥反應的機制。方法:動物實驗采用30只雄性ICR小鼠,隨機分為對照組、造模第3天組、造模第7天組、造模第14天組、造模第28天組,每組6只。對照組飼喂正常飼料,4個造模組飼喂蛋氨酸膽堿缺乏聯(lián)合高脂飼料建立小鼠脂肪性肝損傷模型。造模后取肝臟采用ELISA法檢測LPS含量; qRT-PCR法檢測Toll樣受體4 (TLR4) mRNA的表達;免疫熒光染色觀察TLR4蛋白的分布。細胞實驗采用從小鼠骨髓分離培養(yǎng)的單核/巨噬細胞,分為對照組和LPS組,分別用PBS或LPS刺激6 h后采用qRT-PCR法檢測單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-1β(IL-1β)、誘導型一氧化氮合酶(i NOS)、巨噬細胞炎癥蛋白-1β(MIP-1β)、白細胞介素-6(IL-6) mRNA的表達; ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MCP-1蛋白的含量。結果:5組小鼠肝組織中LPS含量比較,差異無統(tǒng)計學意義(P=0. 313);與對照組比較,造模第14、28天組肝組織中TLR4 mRNA表達增加(P <0. 05)... 

【文章來源】:鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2019,54(03)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗動物與主要試劑
    1.2 小鼠脂肪性肝損傷模型的建立
    1.3 小鼠單核/巨噬細胞的分離和培養(yǎng)
    1.4 小鼠肝組織中LPS檢測和單核/巨噬細胞中MCP-1蛋白檢測
    1.5 小鼠肝組織HE染色
    1.6 小鼠肝組織中Toll樣受體4 (TLR4) 蛋白的免疫熒光染色
    1.7 小鼠肝組織中TLR4和單核/巨噬細胞中炎癥因子mRNA表達水平的檢測
    1.8 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 5組小鼠肝組織中LPS含量及TLR4 mRNA表達的比較
    2.2 小鼠肝組織HE染色和TLR4蛋白免疫熒光染色結果
    2.3 對照組和LPS組各炎癥因子mRNA及MCP-1蛋白表達的比較
3 討論



本文編號:3508996

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