目的:探討苦參堿對阿爾茨海默病模型大鼠海馬突觸超微結(jié)構(gòu)的影響。方法:將Morris水迷宮試驗(yàn)達(dá)標(biāo)的18只雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常對照組、模型組和苦參堿組(15 mg·kg^-1),每組6只。模型組和苦參堿組大鼠雙側(cè)海馬注射凝聚態(tài)Aβ_1-40,正常對照組分別給予等體積藥物或生理鹽水灌胃,持續(xù)28天。采用流式細(xì)胞儀檢測各組實(shí)驗(yàn)動物海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率的變化,使用TUNEL染色檢測海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù),免疫組織化學(xué)法檢測各組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞色素C變化,在透射電鏡下觀察海馬突觸超微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果:流式細(xì)胞儀檢測及TUNEL染色顯示,模型組大鼠海馬陽性細(xì)胞數(shù)明顯高于對照組（P <0.01）,苦參堿組海馬陽性細(xì)胞數(shù)較模型組明顯減少（P <0.01）;用藥組大鼠海馬細(xì)胞色素C陽性產(chǎn)物數(shù)和平均光密度均較模型組明顯減少（P <0.01）;透射電鏡下顯示,對照組海馬神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、線粒體膜、神經(jīng)軸突和神經(jīng)突觸結(jié)構(gòu)完整;模型組神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、線粒體膜、神經(jīng)軸突和神經(jīng)突觸結(jié)構(gòu)破壞;苦參堿組大鼠海馬線粒體和神經(jīng)突觸基本正常。結(jié)論:苦參堿灌胃可減輕大鼠海... 

【文章來源】：世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2019,21(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

大鼠海馬超微結(jié)構(gòu)（透射電鏡×20000）

組出現(xiàn)典型二倍體峰，未見明顯的亞二倍體峰（圖2A）；MC組在二倍體峰前面出現(xiàn)了典型的亞二倍體峰（圖2B），提示有大量凋亡發(fā)生；MAT組的亞二倍體峰明顯降低（圖2C）。分析結(jié)果表明：MC組海馬細(xì)胞凋亡百分率較對照組顯著升高(P<0.01)，而MAT組海馬細(xì)胞凋亡百分率較MC組顯著降低(P<0.01)（表1）。2.3海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)的變化經(jīng)TUNEL染色，陽性細(xì)胞呈棕黃色，染色位于細(xì)圖1大鼠海馬超微結(jié)構(gòu)（透射電鏡×20000）注：A.NC組，B.MC組，C.MAT組。圖2各組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率（流式細(xì)胞直方圖）注：A.NC組，B.MC組，C.MAT組。表1流式細(xì)胞儀檢測和TUNEL染色結(jié)果(xˉ±s,n=6)組別NC組MC組MAT組流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率/%0.23±0.0620.31±3.67△9.76±3.87△▲TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)量/個(gè)0.29±0.0712.78±3.06△6.32±1.48△▲注：與對照組（NC）相比:△P<0.01；與模型組（MC）相比：▲P<0.01631

胞色素C陽性產(chǎn)物數(shù)量和平均光密度明顯高于對照組，且出現(xiàn)大量集中分布現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，Aβ1-40可促使細(xì)胞色素C的釋放，激活線粒體凋亡途徑，促使神經(jīng)細(xì)胞凋亡。有研究表明，Aβ1-40可激活神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞釋放細(xì)胞因子、NO等免疫炎性產(chǎn)物，而AD腦內(nèi)慢性炎癥反應(yīng)可損害海馬突觸結(jié)構(gòu)[24]。因此，筆者認(rèn)為Aβ1-40對突觸的神經(jīng)毒性作用可能與AD腦內(nèi)的免疫炎癥反應(yīng)有關(guān)。MAT是由苦參的干燥根、植株、果實(shí)經(jīng)乙醇等有機(jī)溶劑提取制成，具有較強(qiáng)的抗炎作用。本研究結(jié)果圖3各組大鼠海馬TUNEL染色陽性細(xì)胞注：A:NC組；B:MC組；C:MAT組（TUNEL染色×400）表2大鼠海馬細(xì)胞色素C免疫組織化學(xué)染色結(jié)果(xˉ±s,n=6)組別NC組MC組MAT組免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞個(gè)數(shù)（個(gè)）243.45±11.37415.13±20.44△309.36±13.48△▲免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞平均光密度0.2295±0.09370.3443±0.1269△0.2902±0.0983△▲注：與對照組（NC）相比:△P<0.01；與模型組（MC）相比：▲P<0.01632

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]苦參堿對LPS誘導(dǎo)的阿爾茨海默病小鼠模型學(xué)習(xí)記憶功能和腦內(nèi)神經(jīng)炎癥的影響[J]. 李娟,姚遙,韓懷欽,李瑋琦,李南,苗珍花,李遇春,趙啟躍.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(24)
[2]中藥標(biāo)準(zhǔn)品對人肺癌耐藥細(xì)胞A549/DDP的逆轉(zhuǎn)效果研究[J]. 楊新階,王婧筱,王琳,遲笑怡,遲佳琦,周天,劉銅華,胡凱文.  世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2018(04)
[3]苦參堿對阿爾茨海默癥小鼠學(xué)習(xí)記憶功能和腦內(nèi)氧化應(yīng)激的影響[J]. 姚遙,孫娜,鄭萍,余建強(qiáng),趙荊,李瑋琦,李娟.  寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(09)
[4]苦參堿及其制劑的研究進(jìn)展[J]. 和歡,尚新悅,宋少江.  世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(07)
[5]促紅細(xì)胞生成素對阿爾茨海默病模型大鼠記憶能力及其超微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 李宜培,彭蕤蕤,柴高尚,靳力,王黎.  中國老年學(xué)雜志. 2015(06)
[6]Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)在空間學(xué)習(xí)記憶研究中的應(yīng)用[J]. 武海霞,吳志剛,劉紅彬,沈麗霞.  神經(jīng)藥理學(xué)報(bào). 2014(05)
[7]阿爾茨海默病的防治研究進(jìn)展[J]. 王延江,卜先樂.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(21)
[8]苦參化學(xué)成分研究進(jìn)展[J]. 張翅,馬悅,高慧敏,張啟偉,王智民.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2014(04)
[9]國內(nèi)大鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)現(xiàn)狀與分析[J]. 封敏,盧圣鋒,張承舜,余曙光.  遼寧中醫(yī)雜志. 2011(11)
[10]雷公藤內(nèi)酯醇對AD模型大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響[J]. 黃濤波,呂誠,胡小令,桂婷.  中國老年學(xué)雜志. 2010(19)

博士論文
[1]氧化應(yīng)激在阿爾茨海默病發(fā)病機(jī)制中的作用及其靶點(diǎn)藥物的開發(fā)[D]. 朱曉蕾.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[2]何首烏二苯乙烯苷對缺血性腦損傷和學(xué)習(xí)記憶的影響及其機(jī)制[D]. 王婷.華中科技大學(xué) 2009



本文編號：3475918