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β 2 腎上腺素能受體激動劑/拮抗劑對人骨髓間充質(zhì)干細胞PPARγ 2 mRNA表達的影響

發(fā)布時間:2021-11-01 23:25
  目的研究β2腎上腺素能受體(ADRβ2 R)激動劑/拮抗劑對成骨誘導(dǎo)的人骨髓間充質(zhì)干細胞PPARγ2mRNA表達的影響,從而探討交感神經(jīng)系統(tǒng)對骨代謝影響的分子機制。方法抽取健康成年人的骨髓,采用全骨髓培養(yǎng)法獲取hMSCs并培養(yǎng)至2代。通過細胞形態(tài)觀察、成骨誘導(dǎo)分化和流式細胞儀鑒定細胞表型來鑒定hMSCs。成骨誘導(dǎo)7天后,將hMSCs分成A組(ADRβ2 R激動劑)、B組(ADRβ2 R拮抗劑)和C組(對照組),分別按1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L的終濃度分別向A組和B組加入ADRβ2 R激動劑和ADRβ2 R拮抗劑。用熒光定量PCR檢測細胞培養(yǎng)至3天的成脂指標PPARγ2mRNA的表達情況。結(jié)果1經(jīng)成骨誘導(dǎo)的第2代hMSCs上有PPARγ2mRNA表達。2 ADKβ2 R激動劑Salbutamol劑量依賴性增加hMSCs上的PPARγ2

【文章來源】:四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

β 2 腎上腺素能受體激動劑/拮抗劑對人骨髓間充質(zhì)干細胞PPARγ 2 mRNA表達的影響


hMSCs培養(yǎng)14天的生長情況(xl00)

原代培養(yǎng),生長情況


四川大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文結(jié)果的培養(yǎng):養(yǎng)5天后換液時見散在生長,分布不均的單個1)。約培養(yǎng)一周時可見單個細胞形成多個細形成致密貼壁,形成大的集落,排列成柵欄狀,的hMSCs細胞生長旺盛,形態(tài)與原代相似。差顯微鏡下觀察細胞形態(tài):細胞核大,細胞漿胞結(jié)構(gòu)特點。細胞呈紡錘形、梭形、多角形,等的突起。

化學(xué)發(fā)光法,流式細胞儀,上清液,用電


圖3成骨誘導(dǎo)7天的hMSCs(x100)骨分化功能的鑒定:成骨誘導(dǎo)1周后收集上清液用電化學(xué)發(fā)光法測和OCN。結(jié)果:BALp:6.08士1.19林g幾OCN:14.83土3.22ng/mls流式細胞儀表型鑒定(圖4):GGGGGGGGG:SSvSFSSSCCCl當當,00010001000,~~甲,,廳們幣尸~,~r甲n節(jié)附~勺~。。1110PPP川T3LOGGG

【參考文獻】:
期刊論文
[1]吡格列酮對破骨細胞樣細胞整合素β3表達的影響[J]. 朱亦堃,喬振華,朱鐳,李興,史書紅,郗光霞,趙寶珍.  中國藥物與臨床. 2006(05)



本文編號:3470885

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