本文關(guān)鍵詞：神經(jīng)科學(xué)研究中人類(lèi)腦片培養(yǎng)技術(shù)的建立和評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：建立和優(yōu)化離體腦組織切片的培養(yǎng)方法，，制備適用于活組織電生理學(xué)研究的人類(lèi)腦片標(biāo)本。 方法：（1）建立穩(wěn)定的Wistar幼鼠腦片體外培養(yǎng)方法：優(yōu)化嚙齒類(lèi)腦片培養(yǎng)技術(shù)，在切片和培養(yǎng)記錄過(guò)程中使用不同成分的改良人工腦脊液（artificial cerebrospinal fluid，ACSF），采用界面下培養(yǎng)-快速層流技術(shù),在48h內(nèi)動(dòng)態(tài)觀察腦片局域場(chǎng)電位（local field potential，LFP）變化，采用HE染色、氯三苯四唑（triphenyltetrazolium chloride，TTC）染色、尼氏染色動(dòng)態(tài)觀察腦片組織病理學(xué)變化。（2）人類(lèi)腦片體外培養(yǎng)方法：在優(yōu)化嚙齒類(lèi)腦片培養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上，采用神經(jīng)外科深部腦腫瘤切除手術(shù)過(guò)程中，開(kāi)窗切除的非病理大腦皮層組織迅速進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)、修塊和進(jìn)行體外切片培養(yǎng)，并同上過(guò)程監(jiān)測(cè)腦片LFP和神經(jīng)元組織病理學(xué)變化。 結(jié)果：（1）幼鼠和人類(lèi)腦片LFP電生理信號(hào)均可持續(xù)48h以上，但隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈衰減趨勢(shì)；（2）HE染色計(jì)數(shù)腦片神經(jīng)元死亡率隨時(shí)間呈遞增趨勢(shì)，人類(lèi)和幼鼠腦片均可維持50%以上神經(jīng)元存活達(dá)24h；（3）TTC染色腦片IOD值隨時(shí)間呈遞減趨勢(shì)，培養(yǎng)24h后呈衰減趨勢(shì)，48h組仍可見(jiàn)紅色區(qū)域，各觀察時(shí)間點(diǎn)人類(lèi)腦片與幼鼠比較未見(jiàn)明顯差異（P0.05）；（4）尼氏染色I(xiàn)OD值隨時(shí)間呈遞減趨勢(shì)，幼鼠和人類(lèi)腦片在24h后明顯降低，48h后降至較低水平。 結(jié)論：人類(lèi)腦片培養(yǎng)存活時(shí)間與嚙齒類(lèi)腦片相似，可以在切片后保存半數(shù)以上的神經(jīng)元存活達(dá)24h以上，能夠滿(mǎn)足活細(xì)胞神經(jīng)電生理研究要求。采用不同的切片和培養(yǎng)ACSF溶液，聯(lián)合液面下培養(yǎng)-快速層流技術(shù)，可以滿(mǎn)足手術(shù)切除的人類(lèi)非病理大腦皮層組織體外切片培養(yǎng)前經(jīng)過(guò)1h左右的運(yùn)輸時(shí)間。
【關(guān)鍵詞】：人類(lèi)腦片 電生理學(xué) 腦片培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R338
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 中英文縮略詞對(duì)照表9-10
• 第1章 緒論10-13
• 第2章 綜述13-28
• 2.1 大腦皮質(zhì)解剖結(jié)構(gòu)13-14
• 2.2 神經(jīng)元培養(yǎng)概述14-15
• 2.3 腦片培養(yǎng)方法15-17
• 2.3.1 急性腦片培養(yǎng)15-16
• 2.3.2 器官型腦片培養(yǎng)16-17
• 2.4 腦片培養(yǎng)的影響因素17-24
• 2.4.1 腦片營(yíng)養(yǎng)成分18-23
• 2.4.2 腦片制備和培養(yǎng)方式23-24
• 2.5 腦片存活質(zhì)量評(píng)價(jià)24-25
• 2.6 人類(lèi)腦片培養(yǎng)25-28
• 第3章 材料和方法28-37
• 3.1 主要試劑28
• 3.2 主要儀器28-29
• 3.3 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本29
• 3.4 藥物準(zhǔn)備和預(yù)處理29-30
• 3.5 標(biāo)本制備30-31
• 3.6 腦片局域場(chǎng)電位記錄31-32
• 3.7 組織學(xué)染色觀察32-35
• 3.7.1 HE 染色原理32-33
• 3.7.2 HE 染色步驟33-34
• 3.7.3 TTC 染色原理34
• 3.7.4 TTC 染色步驟34
• 3.7.5 尼氏染色原理34-35
• 3.7.6 尼氏染色步驟35
• 3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析35-37
• 第4章 結(jié)果37-45
• 4.1 幼鼠和人類(lèi)腦片電生理信號(hào)37-40
• 4.2 組織學(xué)指標(biāo)40-45
• 4.2.1 HE 染色40-42
• 4.2.2 TTC 染色42-43
• 4.2.3 尼氏染色43-45
• 第5章 討論45-50
• 第6章 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果57-58
• 致謝58

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：神經(jīng)科學(xué)研究中人類(lèi)腦片培養(yǎng)技術(shù)的建立和評(píng)價(jià)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：340216