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旋毛蟲(chóng)5日齡成蟲(chóng)期特異性基因的克隆與表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-06-19 21:44
  旋毛蟲(chóng)病是一種嚴(yán)重的人獸共患病,可感染人及150多種動(dòng)物,呈世界性分布。近年來(lái)在我國(guó)17個(gè)省、市、自治區(qū)發(fā)現(xiàn)有多起人體感染的暴發(fā)流行。河南省為我國(guó)旋毛蟲(chóng)病高發(fā)區(qū)之一,僅鄭州市已發(fā)生7次暴發(fā)流行,發(fā)病400多人。若不及時(shí)診斷和治療,患者死亡率可高達(dá)3%~30%。因而旋毛蟲(chóng)成為我國(guó)肉食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中的首檢寄生蟲(chóng),開(kāi)展旋毛蟲(chóng)病的預(yù)防和控制工作在我國(guó)更具緊迫性和重要性,而預(yù)防和控制旋毛蟲(chóng)病的關(guān)鍵在于建立一套快速、簡(jiǎn)便、特異性高的檢測(cè)手段以及采取各種有效預(yù)防措施降低動(dòng)物感染率。 目前對(duì)旋毛蟲(chóng)病尚無(wú)滿(mǎn)意的診斷方法,病原學(xué)檢查檢出率低且不易為患者接受。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)旋毛蟲(chóng)病的免疫學(xué)診斷進(jìn)行了大量的研究,但所用的診斷抗原多為旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)蟲(chóng)體粗抗原,由于抗原成分復(fù)雜,用于本病的免疫學(xué)診斷時(shí)常與其它寄生蟲(chóng)病發(fā)生交叉反應(yīng)而出現(xiàn)假陽(yáng)性。 對(duì)旋毛蟲(chóng)病的免疫預(yù)防的研究表明,由于旋毛蟲(chóng)在不同的發(fā)育期蟲(chóng)體抗原組分存在明顯的差異且同一期蟲(chóng)體抗原結(jié)構(gòu)也極其復(fù)雜,且在其長(zhǎng)期的寄生生活中,逐漸形成了免疫逃避機(jī)制,目前采用成份復(fù)雜的蟲(chóng)體抗原往往難以取得理想的免疫預(yù)防效果且極不穩(wěn)定,而且旋毛蟲(chóng)的體外培養(yǎng)仍未取得突破,這都... 

【文章來(lái)源】:鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

旋毛蟲(chóng)5日齡成蟲(chóng)期特異性基因的克隆與表達(dá)


ADS期特異性T

氨基酸序列,陽(yáng)性克隆,長(zhǎng)度,測(cè)序


0.4kb一1.skb左右片段(見(jiàn)圖3)。取1號(hào)、3號(hào)克隆切割獲得噬菌體質(zhì)粒后轉(zhuǎn)染XLOLR宿主菌后,用通用測(cè)序引物T3、T7兩端測(cè)序,結(jié)果顯示3號(hào)克隆插入片段全長(zhǎng)1132個(gè)堿基,插入片段位于ECoR工和Xhol之間,為一完整全長(zhǎng)基因,其ORF位于2一1031bp之間,編碼343個(gè)氨基酸、分子量為35.IkDa的多膚分子,測(cè)序及其編碼氨基酸序列結(jié)果見(jiàn)圖4。InterProSCan分析顯示氨基

重組子,菌落,片段,旋毛蟲(chóng)


鄭州口冤學(xué)2002年祠可士論文旋毛蟲(chóng)5日齡成蟲(chóng)期特異性堵‘因的分子克隆與表達(dá)門(mén)面面面面面面面面面面面面面面面DHSQ宿主菌后,長(zhǎng)出50多個(gè)菌落,經(jīng)kan+平板篩選,裂解液快速鑒定后,初步篩出6個(gè)菌落。任挑取1個(gè)篩出的菌落,小提質(zhì)粒,BamH工和Xho工雙酶切鑒定,應(yīng)產(chǎn)生1164bp、5329bp片段。用Smal酶切應(yīng)產(chǎn)生2387bp、4lO6bp片段。對(duì)照pET28a空載體用BamHI和Xhol雙酶切,應(yīng)產(chǎn)生5329bp片段。酶切鑒定結(jié)果見(jiàn)圖10,與預(yù)期結(jié)果相符。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]旋毛蟲(chóng)5日齡成蟲(chóng)期特異性基因片段的克隆及鑒定[J]. 付寶權(quán),劉明遠(yuǎn),王鋒,吳秀萍,盧強(qiáng),黎誠(chéng)耀,竇蘭清,P.Boireau.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2001(11)
[2]旋毛蟲(chóng)新生幼蟲(chóng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建[J]. 劉明遠(yuǎn),付寶權(quán),盧強(qiáng),吳秀萍,姚春雨,宇麗,竇蘭清,P.Boireau.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2001(03)
[3]我國(guó)旋毛蟲(chóng)病流行病學(xué)概況與研究前瞻[J]. 劉明遠(yuǎn).  中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 1998(S2)
[4]中國(guó)旋毛蟲(chóng)分離株成蟲(chóng)和新生幼蟲(chóng)基因文庫(kù)的構(gòu)建及篩選[J]. 劉明遠(yuǎn),徐克誠(chéng),黎誠(chéng)耀,柳增善,孫遠(yuǎn)濤,趙君,鄭明光.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1998(02)
[5]旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)ES抗原特異性蛋白2個(gè)結(jié)構(gòu)基因的分子克隆及其高效表達(dá)[J]. 閻玉河,童光志,盧景良.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1997(06)
[6]旋毛蟲(chóng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建[J]. 雷莉,翟朝陽(yáng),田玉,陳盛文.  實(shí)用寄生蟲(chóng)病雜志. 1997(01)
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[8]云南邊疆民族地區(qū)主要人獸共患寄生蟲(chóng)分類(lèi)與流行病學(xué)研究[J]. 黃德生,解天珍,郭正,楊榮麗.  中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲(chóng)病. 1996(03)
[9]旋毛蟲(chóng)肌幼蟲(chóng)ES抗原的基因克隆及高效表達(dá)[J]. 閻玉河,許威光,陳輝,馬增全,朱元曉,蔡仕英.  生物工程學(xué)報(bào). 1994(01)
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本文編號(hào):3238597

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