發(fā)布時(shí)間：2017-04-24 05:07

  本文關(guān)鍵詞：饑餓時(shí)相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的饑餓條件下機(jī)體處于營養(yǎng)物質(zhì)和能量攝入不足或缺乏的狀態(tài),自噬是一個(gè)基本的生物學(xué)過程,其基本功能之一是使細(xì)胞在饑餓和其他形式的脅迫期間能夠消化其自身的胞質(zhì)成分而維持細(xì)胞的存活。機(jī)體對饑餓狀態(tài)代謝反應(yīng)的整體調(diào)節(jié)是復(fù)雜變化的,且自噬本身也是一個(gè)隨時(shí)間連續(xù)變化的動(dòng)態(tài)過程。腦作為神經(jīng)中樞,其由饑餓引起的應(yīng)激反應(yīng)具有特殊性。本研究擬經(jīng)自噬體的角度,探討?zhàn)囸I時(shí)相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響。方法健康雄性SPF級SD大鼠105只,3月齡,體重330~370g,采用分層隨機(jī)化法分為3組:正常對照組(C組,n=15)、短期饑餓組(SS組,n=45)和長期饑餓組(LS組,n=45);SS組隨機(jī)分為饑餓1d(S1亞組)、2d(S2亞組)、3d(S3亞組)三個(gè)亞組(n=15),LS組隨機(jī)分為饑餓5d(S5亞組)、7d(S7亞組)、9d(S9亞組)三個(gè)亞組(n=15)。饑餓期間大鼠無飼料供應(yīng),自由飲水。各組饑餓處理結(jié)束后,采用蘇木素-伊紅(HE)染色觀察腦組織病理學(xué)改變,采用透射電子顯微鏡觀察腦組織超微結(jié)構(gòu),采用免疫組織化學(xué)染色檢測自噬相關(guān)基因LC3與Beclin 1的表達(dá),采用Western blot法測定大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1的表達(dá)水平。結(jié)果1 HE染色觀測結(jié)果:C組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整;與C組比較,SS組腦組織病理學(xué)改變不明顯;LS組可見部分神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生改變,且隨著饑餓時(shí)間的延長,病理改變加重。2透射電子顯微鏡觀測結(jié)果:C組神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)完整;SS組可見部分線粒體輕度腫脹;LS組可見毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,基膜破損,線粒體呈現(xiàn)不同程度的損傷,可見包裹細(xì)胞器的自噬體。3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:與C組比較,SS組的S1和S2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),S3亞組LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.05),LS組LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.01);與SS組比較,LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.01)。各亞組間,S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與S1和S2亞組比較,S3亞組LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.05);S3、S5、S7亞組LC3與Beclin 1表達(dá)逐漸上調(diào)(P0.01);與S7亞組比較,S9亞組LC3表達(dá)上調(diào)(P0.01),而Beclin 1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4 Western blot檢測結(jié)果:與C組比較,SS組的S1和S2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin 1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),S3亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.01),LS組LC3-Ⅱ與Beclin1表達(dá)上調(diào)(P0.01);與SS組比較,LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.01)。各亞組間,S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與S1和S2亞組比較,S3亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達(dá)上調(diào)(P0.01);S3、S5、S7亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達(dá)逐漸上調(diào)(P0.01);與S7亞組比較,S9亞組LC3-Ⅱ表達(dá)上調(diào)(P0.01),而Beclin 1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論短期饑餓2天內(nèi)大鼠大腦皮質(zhì)自噬水平未發(fā)生明顯改變,隨著饑餓時(shí)間的延長,自噬體數(shù)量增多,長期饑餓狀態(tài)下自噬體數(shù)量的增多可能與自噬功能紊亂有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：自噬 饑餓時(shí)相 大腦皮質(zhì) LC3 Beclin 1
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-13
• 第1章 饑餓時(shí)相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響13-39
• 1.1 材料與方法13-21
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.1.2 主要試劑13-14
• 1.1.3 主要試劑的配制14-15
• 1.1.4 主要儀器及耗材15-16
• 1.1.5 動(dòng)物分組16
• 1.1.6 形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織的取材與處理16-17
• 1.1.7 大鼠腦組織石蠟切片HE染色17
• 1.1.8 透射電子顯微鏡檢測17-18
• 1.1.9 免疫組織化學(xué)染色檢測自噬相關(guān)基因LC3與Beclin 1 的表達(dá)18-19
• 1.1.10 Western blot測定自噬相關(guān)基因LC3與Beclin 1 的表達(dá)水平19-21
• 1.1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21
• 1.2 結(jié)果21-33
• 1.2.1 病理學(xué)HE染色觀測結(jié)果21
• 1.2.2 透射電子顯微鏡觀測結(jié)果21-22
• 1.2.3 大鼠大腦皮質(zhì)LC3、Beclin 1 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果22-23
• 1.2.4 大鼠大腦皮質(zhì)LC3、Beclin 1 的Western blot檢測結(jié)果23-33
• 1.3 討論33-36
• 1.3.1 饑餓模型的建立33
• 1.3.2 營養(yǎng)饑餓條件下的細(xì)胞自噬33-34
• 1.3.3 饑餓時(shí)相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響34-36
• 1.4 結(jié)論36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 第2章 綜述 饑餓狀態(tài)下的細(xì)胞自噬39-57
• 2.1 自噬的分類39
• 2.2 自噬發(fā)生的分子機(jī)制39-41
• 2.3 細(xì)胞自噬的研究方法41-45
• 2.3.1 基于自噬體的形態(tài)學(xué)檢測41-42
• 2.3.2 基于自噬流量的動(dòng)態(tài)檢測42-45
• 2.4 自噬與饑餓45-50
• 2.4.1 饑餓狀態(tài)下細(xì)胞自噬的作用45-46
• 2.4.2 饑餓狀態(tài)下自噬信號通路的調(diào)節(jié)機(jī)制與酶學(xué)基礎(chǔ)46-49
• 2.4.3 分子伴侶介導(dǎo)的自噬與饑餓49-50
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 致謝57-58
• 導(dǎo)師簡介58-59
• 作者簡介59-60
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集60

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：323615