本文關鍵詞：間充質干細胞的條件培養(yǎng)上清影響PC12細胞帕金森病模型增殖的作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)可以通過分化為神經(jīng)元樣細胞、調節(jié)免疫和誘導原位神經(jīng)生長因子的分化等機制發(fā)揮神經(jīng)修復及促進神經(jīng)系統(tǒng)生長的作用。粒細胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF)可以促進神經(jīng)分化和神經(jīng)元增殖、抵抗神經(jīng)系統(tǒng)病變時的炎癥,具有明顯的對神經(jīng)系統(tǒng)的保護作用,可以促進神經(jīng)損傷時結構的重建與功能的修復。帕金森病(Parkinson's disease, PD)是一種以中腦黑質-紋狀體通路內的多巴胺能神經(jīng)元進行性退變?yōu)橹饕±硖卣鞯牟∽儭Ｎ覀冞\用MSCs的條件培養(yǎng)上清刺激PC12細胞的帕金森病細胞模型的增殖,以此驗證MSCs的促神經(jīng)生長作用,并且推測其中含有G-CSF的條件培養(yǎng)上清促進實驗細胞增值的作用更強。目的分離、培養(yǎng)以及鑒定間充質干細胞,探討其條件培養(yǎng)上清對PC12細胞及該細胞帕金森病模型增殖的影響。方法我們采用組織塊貼壁法從臍帶組織中分離出長梭形細胞,后用流式細胞術鑒定其免疫表型,用染色法鑒定其成脂與成骨分化能力；用Mpp+處理PC12細胞的方法建立PD細胞模型；之后用刀豆素A (conA)刺激MSCs后收集其條件培養(yǎng)上清,比較觀察其與正常MSCs上清對PC12及其PD模型增殖能力的影響,并用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測兩種上清內粒細胞集落刺激因子(G-CSF)的含量。結果1.應用組織塊貼壁法分離臍帶間充質干細胞,對分離得到的細胞培養(yǎng)后進行免疫表型鑒定示其高表達干細胞表面標志CD105、CD73、CD90,而不表達造血細胞表面標志CD19、CD34和CD45,符合MSCs表型特征。2.用以上同樣方法檢測加入誘導劑conA的MSCs,經(jīng)過誘導后的MSCs細胞表型未發(fā)生改變。3.對實驗分離細胞在不同培養(yǎng)基中進行成脂及成骨誘導分化,后分別經(jīng)過ALP染色和Oil red O染色鑒定,實驗中分離的細胞具有良好的成脂與成骨分化能力。同樣方法鑒定經(jīng)conA處理的MSCs成骨、成脂分化能力未發(fā)生明顯變化。4.經(jīng)過cck-8試劑盒檢測,經(jīng)過Mpp+處理PC12細胞模型組細胞數(shù)量是正常組細胞數(shù)量的一半。5.與對照組相比,MSC條件培養(yǎng)上清可提高PC12細胞及其帕金森病模型組細胞的增殖能力,而經(jīng)conA處理后的MSC條件上清對細胞增殖能力的促進作用更加顯著,差別有統(tǒng)計學意義。6.經(jīng)過ELISA檢測,經(jīng)過conA誘導的MSC條件培養(yǎng)上清中G-CSF濃度(33.52pg/mL)顯著高于未經(jīng)處理的MSC上清中的含量(12.03pg/mL)結論1.實驗分離得到的細胞為間充質干細胞,conA的誘導不改變其MSC細胞學特性。2.PC12細胞PD細胞模型造模成功。3.MSCs條件培養(yǎng)上清可以促進PC12細胞及其PD細胞模型的增殖,G-CSF可能具有顯著促進實驗細胞增殖的作用。
【關鍵詞】：間充質干細胞 PC12細胞 帕金森病 增殖 粒細胞集落刺激因子
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R742.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 實驗材料13-17
• 實驗方法17-24
• 實驗結果24-25
• 討論25-31
• 結論31-32
• 附圖32-35
• 參考文獻35-40
• 綜述：造血調控因子在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用40-53
• 參考文獻48-53
• 附錄53-55
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況55-56
• 致謝56-58
• 個人簡歷58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關鍵詞：間充質干細胞的條件培養(yǎng)上清影響PC12細胞帕金森病模型增殖的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：321566