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GnIH對(duì)卵巢摘除術(shù)后補(bǔ)充雌激素大鼠下丘腦POMC陽(yáng)性神經(jīng)元的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-07 23:48
  目的:探討促性腺激素抑制激素(Gn IH/RFRP-3)對(duì)卵巢摘除術(shù)補(bǔ)充雌激素(OEP)大鼠下丘腦阿片-促黑素細(xì)胞皮質(zhì)素原(POMC)陽(yáng)性神經(jīng)元的影響。方法:65只成年雌性SD大鼠,隨機(jī)選取2只用于免疫熒光多重染色,觀察Gn IH/RFRP-3與POMC在大鼠下丘腦神經(jīng)元的表達(dá);隨機(jī)選取3只用于免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn),檢測(cè)Gn IH/RFRP-3與POMC的相互作用;余下60只建立卵巢摘除術(shù)補(bǔ)充雌激素(OEP)大鼠模型,模型組隨機(jī)分成注射Gn IH實(shí)驗(yàn)組和生理鹽水對(duì)照組,每組30只,每組根據(jù)注射時(shí)間不同分為20、40、60、120、240、360min等共6個(gè)亞組,每組5只,采用Western Blot法檢測(cè)Gn IH/RFRP-3處理對(duì)下丘腦POMC表達(dá)的影響。結(jié)果:免疫熒光多重標(biāo)記結(jié)果顯示,Gn IH/RFRP-3與POMC共表達(dá)于大鼠下丘腦神經(jīng)元; Co-IP結(jié)果證明,Gn IH/RFRP-3與POMC存在相互作用; Western Blot結(jié)果表明,注射Gn IH/RFRP-3后20 min組大鼠下丘腦POMC蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P <0. 05),注射60、... 

【文章來(lái)源】:神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2019,35(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑與儀器
    2 方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        2.2 制備卵巢摘除術(shù)后補(bǔ)充雌激素 (OEP) 大鼠模型及側(cè)腦室注射
        2.3免疫熒光多重標(biāo)記方法檢測(cè)GnIH/RFRP-3與POMC在下丘腦神經(jīng)元的表達(dá)
        2.4 免疫共沉淀 (Co-immunoprecipitation, Co-IP) 檢測(cè)GnIH/RFRP-3與POMC的相互作用
        2.5 Western Blot檢測(cè)POMC蛋白表達(dá)
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1GnIH/RFRP-3與POMC共表達(dá)于下丘腦同一神經(jīng)元內(nèi)
    2 Gn IH/RFRP-3與POMC存在相互作用
    3 Gn IH/RFRP-3抑制POMC蛋白表達(dá)
討論



本文編號(hào):3174260

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