目的：研究SNP敏感性納米級復合分子開關在Y染色體識別中的應用。 方法：選擇性別表型正常者為研究對象，肘正中靜脈采血5ml，加0.5ml肝素抗凝，-20℃保存?zhèn)溆�。采用酚／氯仿法提取基因組DNA，0.8％瓊脂糖凝膠電泳鑒定，紫外分光光度儀測定OD260／280值，分管保存?zhèn)溆�。根據Y染色體基因序列及SNP信息，設計引物。實驗分四步驟進行。首先采用X染色體特異性引物X1、Y染色體特異性引物Y02和Y染色體常染色體同源區(qū)引物Y2進行普通PCR對已知性別的樣本進行檢測，比較Taq酶與Pfu酶實驗結果的差異；其次用實時定量PCR和分子開關，Y染色體特異性引物Y02和Y染色體常染色體同源區(qū)引物Y2，對已知性別的樣本進行檢測；第三用普通PCR，Y染色體M45（rs2032631）、M89（rs2032652）、M172（rs2032604）SNP位點引物，對已知性別的樣本進行檢測，比較Taq酶與Pfu酶實驗結果的差異；最后用反向巢式PCR對Y染色體M45（rs2032631）、M89（rs2032652）、M172（rs2032604）SNP位點進行檢測，比較Taq酶與Pfu酶實驗結果的差異... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數】：43 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Taq酶介導的引物延伸反應電泳圖

小于女性DNA樣本，陰性對照未見指數擴增曲線;使用引物Y02的引物延伸反應中，只有男性DNA樣本指數擴增曲線，女性DNA樣本和陰性對照未見指數擴增曲線(圖3，4，5，6)。圖3引物Y2實時PCR擴增曲線圖

引物Y2實時PcR產物熔點曲線圖


本文編號：3136796