幽門螺桿菌 （Helicobacter pylori, Hp） 的高感染率及其嚴重的危害性,使Hp疫苗成為醫(yī)學微生物領域研究的熱點之一，為探討過氧化氫酶（Catalase, KatA）作為基因工程疫苗候選抗原在防治Hp 感染中的作用，本研究采用PCR方法從Hp臨床分離株中克隆katA基因（katA），構建Hp過氧化氫酶高效表達載體，并對重組工程菌的表達條件進行優(yōu)化；重組蛋白KatA（rKatA）經鎳離子親和層析純化后，以Western blot、ELISA及動物實驗檢測其免疫學活性。在此基礎上，進一步采用重疊延伸技術將大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位（E. coli heat-labile enterotoxin B subunit, LTB）基因（ltB）和katA基因以不同次序進行融合并分別在大腸桿菌中進行表達，篩選較理想的KatA-LTB融合蛋白表達載體，以期獲得既具有免疫學活性又具有粘膜佐劑活性的KatA-LTB融合蛋白，為進一步研制Hp分子內佐劑亞單位疫苗奠定基礎。全文結果與結論如下：1．采用PCR技術分別從我國臨床分離的Hp菌株及國際標準菌株NCTC11637中克隆了Hp ka... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：95 頁

【學位級別】：碩士

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英文摘要
論文正文：幽門螺桿菌KatA及KatA與大腸桿菌LTB融合蛋白的表達研究
    前言
    第一部分 幽門螺桿菌過氧化氫酶的基因克隆、表達及免疫學活性研究
        第一節(jié) 幽門螺桿菌過氧化氫酶的基因克隆、表達
            實驗材料
            實驗方法
            結果
        第二節(jié) 幽門螺桿菌過氧化氫酶的高效表達與純化
            實驗材料
            實驗方法
            結果
        第三節(jié) 重組蛋白的免疫學活性研究
            實驗材料
            實驗方法
            結果
        討論
    第二部分 幽門螺桿菌KatA與大腸桿菌LTB融合蛋白的表達
        實驗材料
        實驗方法
        結果
        討論
    全文總結
    參考文獻
文獻綜述 自由基損傷在幽門螺桿菌相關胃病中的作用
    參考文獻
致謝
攻讀碩士期間撰寫的文章


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3128797