蛋白質(zhì)序列分析是蛋白質(zhì)研究中的核心技術(shù)。N端測序已經(jīng)成為十分完善的技術(shù)，并已經(jīng)實現(xiàn)了自動化。C端與N端一樣，在蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析中具有重要地位，不僅對N端封閉的蛋白質(zhì)進行序列測定，而且對基因克隆具有指導意義。盡管Schlack-Kumpf降解法的研究進展緩慢，但是近十年研究表明該方法是很有希望成為C端順序測定的常規(guī)方法。 在蛋白質(zhì)C端（異）硫氰酸法順序測定技術(shù)中，標準氨基酸乙內(nèi)酰硫脲（TH-AA）的制備是必須首先要解決的問題。本文以L-型氨基酸為原料，采用乙酸酐做活化試劑，TBS-ITC為偶聯(lián)試劑，制備了20種TH-AA，反應產(chǎn)物通過RP-HELC進行了分離純化。 本文同時在偶聯(lián)試劑方面進行了探索，采用合成的13肽（NH₂-KKESDFLMFVYLV-COOH）為模型肽，并偶聯(lián)到DITC玻璃珠上進行了方法學研究。通過實驗條件的優(yōu)化對C-端序列分析的化學方法進行了微量化探索，在0.5nmol規(guī)�？色@得三個氨基酸C-端序列信號。改變偶聯(lián)試劑的濃度發(fā)現(xiàn)在0.2mol／L可獲得最佳的偶聯(lián)效果。同時應用兩種偶聯(lián)試劑TBS-ITC和TPGe-ITC進行了C-端序列... 

【文章來源】：湖南師范大學湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮寫表（中英文對照）
中文摘要
英文摘要
第一部分 C-端序列分析的方法學研究
    第一章 前言
    第二章 標準氨基酸乙內(nèi)酰硫脲的制備
    第三章 合成用于方法學研究的模型肽
    第四章 兩種偶聯(lián)試劑序列分析的比較
    第五章 進一步研究設想
第二部分 有關(guān)虎紋鎮(zhèn)痛肽的性質(zhì)研究
    第一章 HWAP-Ⅰ活性單位測定
    第二章 HWAP-Ⅰ的穩(wěn)定性實驗
參考文獻
致謝
原創(chuàng)性聲明


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3127339