利用穩(wěn)定的稀土標(biāo)記物BHHCT-Eu3+、BPTA-Tb3+和銪納米顆粒建立夾心型固相時(shí)間分辨熒光免疫分析（TrFIA）直接定量測(cè)定乙肝表面抗原（HBsAg）的新方法。結(jié)果表明，使用BHHCT-Eu3+-HBsAb、BHHCT-Eu3+-SA-BSA、BPTA-Tb3+-SA和銪納米顆粒-HBsAb四種標(biāo)記物的最低檢出限分別為0． 2 ng／mL、0． 05 ng／mL、0． 06 ng／mL和0． 03 ng／mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0-100 ng／mL（BPTA-Tb3+-SA的為0-50 ng／mL）。采用相同的抗原和抗體，ELISA的最低檢出限為0． 5 ng／mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0-10 ng／mL，說明稀土標(biāo)記物TrFIA具有明顯提高的定量檢測(cè)能力。四種標(biāo)記物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品或血清樣品的批內(nèi)變異系數(shù)CV均小于10％，后三種檢測(cè)陽性血清的回收率為85％-110％。使用銪納米顆粒標(biāo)記物的TrFIA和ELISA兩種方法同時(shí)定量檢測(cè)31份HBsAg陽性血清，兩者的相關(guān)系數(shù)達(dá)0． 98。另外，以磁性微球作為免疫反應(yīng)的固相，銪納米顆粒作為標(biāo)記物，建立起固相磁分離TrFIA定量測(cè)定HBsAg的... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
一 前言
    （一） 稀土絡(luò)合物的特點(diǎn)
    （二） 時(shí)間分辨熒光分析法的原理
    （三） 時(shí)間分辨熒光分析法的應(yīng)用
    （四） 稀土絡(luò)合劑的分類及主要TrFIA系統(tǒng)
二 材料與方法
    （一） 材料
        1 主要材料與試劑
        2 溶液配置
        3 主要儀器
    （二） 方法
        1 銪和鋱絡(luò)合物用于HBsAg的時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)
            1. 1 BHHCT-Eu3+-HBsAb的制備
            1. 2 BHHCT-Eu3+-SA-BSA的制備
            1. 3 羊抗人HBsAb的生物素化
            1. 4 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA 測(cè)定HBsAg
            1. 5 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA測(cè)定HBsAg
            1. 6 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA測(cè)定HBsAg
        2 銪納米顆粒超高靈敏時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg
            2. 1 銪納米顆粒-HBsAb復(fù)合物的制備
            2. 2 銪納米顆粒-HBsAb-TrFIA測(cè)定HBsAg
        3 磁分離時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg的新方法
            3. 1 磁性微球．HBsAb復(fù)合物的制備
            3. 2 磁分離時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg的新方法
三 結(jié)果與討論
    1 銪和鋱絡(luò)合物用于HBsAg的時(shí)間分辨熒光免疫檢
        1. 1 BHHCT和BPTA的性質(zhì)
        1. 2 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA測(cè)定HBsAg
        1. 3 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA測(cè)定HBsAg
        1. 4 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA測(cè)定HBsAg
        結(jié)論
    2 銪納米顆粒超高靈敏時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg
        2. 1 銪納米顆粒的性質(zhì)
        2. 2 銪納米顆粒-HBsAb-TrFIA測(cè)定HBsAg
        結(jié)論
    3 磁分離時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg的新方法
        3. 1 磁性微球的性質(zhì)
        3. 2 磁分離時(shí)間分辨熒光免疫檢測(cè)HBsAg的新方法
        結(jié)論
四 展望
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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