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腸炎沙門菌YbjX基因缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究

發(fā)布時間:2021-01-27 19:57
  為研究腸炎沙門菌外膜蛋白YbjX對該菌致病作用的影響,本研究利用λ-Red同源重組系統(tǒng)構(gòu)建了腸炎沙門菌(C50336)YbjX基因缺失突變株(C50336ΔYbjX),并對其生物學(xué)特性進行分析,探究YbjX蛋白在腸炎沙門菌致病過程中的作用。結(jié)果顯示,缺失株C50336ΔYbjX與野生型菌株和回復(fù)菌株相比,其生長速度、生化特性無明顯差異,但其在血清中和蛋清中的存活能力明顯下降。此外,藥敏試驗結(jié)果表明YbjX基因缺失會引起沙門菌藥物敏感性增強。進一步的,動物致病性實驗表明,YbjX基因缺失會引起沙門菌毒力和巨噬細胞內(nèi)存活能力的嚴重下降。本研究證實YbjX基因與腸炎沙門菌毒力密切相關(guān),為進一步闡釋腸炎沙門菌感染致病機制奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】:中國人獸共患病學(xué)報. 2019,35(04)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

腸炎沙門菌YbjX基因缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究


圖1腸炎沙門菌YbX基因缺失株的驗證M.DL2000plusMarker;1.C50336;2.C50336YbjX::cat;3.C50336ΔYbjX

腸炎沙門菌,基因缺失,巨噬細胞


因缺失菌株和回補菌株等量感染鼠源巨噬細胞Raw264.7,測定3者在鼠源巨噬細胞內(nèi)存活能力。結(jié)果顯示,野生型細菌在Raw264.7細胞內(nèi)的增殖率(23h/3h)達到40多倍,而對應(yīng)的YbjX基因缺株在Raw264.7細胞內(nèi)的增殖率(23h/3h)率約26倍(圖3),下降顯著(P<0.05)。上述結(jié)果表明,YbjX蛋白參與調(diào)控腸炎沙門菌在巨噬細胞內(nèi)的存活和增殖。2.6YbjX基因缺失對腸炎沙門菌血清和蛋清生存圖3YbjX基因缺失對腸炎沙門菌C50336在巨噬細胞Raw264.7胞內(nèi)存活的影響Fig.3SurvivalanalysisofC50336isogenicdeletionstrainsbyRaw264.7cells的影響將腸炎沙門菌野生型菌株、YbjX基因缺失株及回補菌株與健康雞血清混合,評測其在血清中生存的影響,結(jié)果(圖4A)顯示,野生型菌株能夠在雞血清中很好的增殖,而YbjX基因缺失株生長速率遠低于野生型菌株,回復(fù)菌株血清生存能力得到部分恢復(fù)。進一步,我們檢測了腸炎沙門菌各菌株在蛋清中存活能力。結(jié)果表明(圖4B)YbjX基因缺失后腸炎沙門菌在蛋清內(nèi)的存活能力顯著下降,證明YbjX蛋白參與腸炎沙門菌的蛋內(nèi)存活。2.7YbjX基因缺失對腸炎沙門菌毒力的影響利用小鼠模型測定腸炎沙門菌野生型菌株和YbjX基因缺失株的LD50,C50336和缺失菌株的LD50分別為3.98×105和1.43×107cfu,表明缺失株毒

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]沙門氏菌生物學(xué)研究進展[J]. 朱奇,陸斌興,覃有泉,樊秋云.  疾病監(jiān)測與控制. 2015(07)
[4]非編碼小RNA(sraB)調(diào)控腸炎型沙門菌的抗蛋清抑菌作用[J]. 蔣惠源,曹鳴輝,曹學(xué)松,顧宏偉,曾科.  微生物學(xué)報. 2010(11)



本文編號:3003639

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