目的：對(duì)廣西、貴州的4株伯氏疏螺旋體分離株進(jìn)行基因種鑒定，進(jìn)而克隆其外膜蛋白A（OSPA），測序分析其變異情況，體外表達(dá)OSPA基因，獲取OSPA蛋白，為制備診斷試劑和疫苗研究作基礎(chǔ)準(zhǔn)備。方法：利用5s-23srRNA（rrf-rrl）基因間隔區(qū)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其產(chǎn)物插入質(zhì)粒pGEM-T Easy中，構(gòu)建重組質(zhì)粒，經(jīng)測序并與國外分離株進(jìn)行同源性比較，鑒定4株伯氏疏螺旋體（GXLD-4、9、18和長14）的基因型。應(yīng)用PCR技術(shù)、分子克隆、原核表達(dá)等方法從4株伯氏疏螺旋體全細(xì)胞DNA組中擴(kuò)增得到OSPA基因，分別克隆到質(zhì)粒pGEM-T Easy上，對(duì)陽性克隆進(jìn)行測序和序列分析，與國外分離株進(jìn)行同源性比較，并用限制性內(nèi)切酶NdeI和XhoI從重組質(zhì)粒pGEM-T Easy-OSPA上將OSPA基因切下，分別克隆到表達(dá)載體pET3oa中，在大腸桿菌BL₂1中進(jìn)行表達(dá)。結(jié)果：GXLD-4、9、18及長14株（貴州）均可擴(kuò)增出242bp的5s-23srRNA間隔區(qū)基因，同源性達(dá)99％以上。與Borrelia valaisiana基因種的同源性均比其他基因種高，核苷酸同源... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一、 英文縮寫
二、 摘要
    1 中文摘要
    2 英文摘要
三、 論文
    第一部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    第二部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
四、 綜述
五、 致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國萊姆病的研究新進(jìn)展[J]. 張知德,萬康林.  中國公共衛(wèi)生. 2000(11)
[2]中國萊姆病研究的進(jìn)展[J]. 張哲夫.  中華流行病學(xué)雜志. 1999(05)
[3]萊姆病的研究近況[J]. 張哲夫.  臨床內(nèi)科雜志. 1999(04)
[4]中國萊姆病的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 萬康林.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 1998(06)
[5]10株中國萊姆病螺旋體超微結(jié)構(gòu)的研究[J]. 萬康林,沈壯,張哲夫,李美茹,張金聲,侯學(xué)霞.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 1998(06)
[6]中國20個(gè)省、區(qū)、市動(dòng)物萊姆病初步調(diào)查研究[J]. 萬康林,張哲夫,張金聲,竇桂蘭,王宏英,侯學(xué)霞,朱桂鳳.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 1998(05)
[7]中國萊姆病螺旋體主要生物媒介的調(diào)查研究[J]. 萬康林,張哲夫,竇桂蘭,侯學(xué)霞,王宏英,張金聲,朱桂鳳.  中華流行病學(xué)雜志. 1998(05)
[8]Dot-ELISA檢測萊姆病血清抗體的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉振龍,趙文明,張力平.  微生物學(xué)通報(bào). 1998(04)
[9]廣東首次分離到萊姆病螺旋體[J]. 陳戊申,萬康林,郝瑞豐,何劍峰,何立,羅會(huì)明,曾漢武,張金聲,張哲夫.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 1998(04)
[10]葡萄膜炎與萊姆病[J]. 朱淑琴,張惠英,葛春英,于忠誠.  中國媒介生物學(xué)及控制雜志. 1998(01)



本文編號(hào)：2959296