鐮刀菌素C（FC）是從串珠鐮刀菌培養(yǎng)提取物中分離到的一種致突，致癌的真菌毒素。串珠鐮刀菌廣泛存在于各種植物宿主中，并已查明這種霉菌是食管癌高發(fā)區(qū)玉米中的優(yōu)勢(shì)菌之一。給大鼠灌喂3H-FC后，小腸，前胃和肝放射性最高。腎、膀胱和食管次之，脾最低。血中放射性在給³H-FC后3小時(shí)達(dá)高峰。給予³H-FC后48小時(shí)內(nèi)尿和糞便累積排出放射性占給予量的58.5％。³H-FC在大鼠體內(nèi)有94.6％代謝轉(zhuǎn)化成其他代謝產(chǎn)物。在體外大鼠食管組織培養(yǎng)中。³H-FC能與其DNA共價(jià)結(jié)合。但FC不能誘導(dǎo)大鼠食管上皮（REE）細(xì)胞非程序DNA合成增高。FC處理的REE細(xì)胞表現(xiàn)出以下惡性轉(zhuǎn)化特征，能在無血清，無EGF的選擇培養(yǎng)基中繼續(xù)生長(zhǎng)并能在半固體瓊脂上形成集落；染色體核型已發(fā)生變化，數(shù)目增多，結(jié)構(gòu)畸變；N-ras、C-myc和V-erb-B三種癌基因mRNA表達(dá)水平增高；失去了對(duì)TPA調(diào)常C-myc基因表達(dá)的反應(yīng)；但未能在裸鼠體內(nèi)形成腫瘤。這些結(jié)果表明這種細(xì)胞已處于癌前（Pre-neoplastic）階段。 此外，原位雜... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
論文題目
中文摘要
英文摘要
本文所用縮寫
第一章 緒論
    一、串珠鐮刀菌培養(yǎng)粗提物致突變和致癌作用研究概況
    二、FC致突變,致癌作用研究概況
    三、化學(xué)致癌過程中的細(xì)胞和分子變化
第二章 材料與方法
    一、串珠鐮刀菌培養(yǎng)及FC提取
    二、3H—FC在大鼠體內(nèi)的代謝
    三、3H—FC與大鼠食管DNA結(jié)合
    四、正常大鼠食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
        1.培養(yǎng)基和溶液
        2.基質(zhì)
        3.原代細(xì)胞培養(yǎng)
        4.傳代細(xì)胞培養(yǎng)
        5.培養(yǎng)細(xì)胞鑒定
    五、REE細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
        1.致癌物
        2.細(xì)胞
        3.致癌物處理及S9混合物配制
        4.轉(zhuǎn)化細(xì)胞的早期初步篩選
        5.半固體瓊脂生長(zhǎng)和裸鼠致癌試驗(yàn)
        6.染色體制備
    六、UDS試驗(yàn)
    七、ras,myc和erb-B三種癌基因探針的原位雜交
        1.缺口翻譯標(biāo)記探針
        2.雜交液及雜交用溶液
        3.致癌物或促癌物處理細(xì)胞
        4.雜交前處理及雜交
        5.涂乳膠、暴光、顯影和定影
        6.細(xì)胞銀顆粒計(jì)數(shù)
第三章 結(jié)果
    一、3H—FC在大鼠體內(nèi)的代謝
        1.3H—FC在大鼠組織中的分布
        2.血中放射性濃度—時(shí)間曲線
        3.3H—FC經(jīng)尿和糞便的排泄
        4.尿中代謝產(chǎn)物的初步鑒定
    二、3H—FC在體外與大鼠食管DNA結(jié)合
    三、正常大鼠食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)
        1.上皮細(xì)胞系
        2.細(xì)胞系特性
    四、FC對(duì)REE細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化作用
        1.轉(zhuǎn)化細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)特性
        2.相對(duì)存活率
        3.轉(zhuǎn)化頻率
        4.半固體瓊脂集落形成率
        5.轉(zhuǎn)化細(xì)胞染色體核型改變
        6.轉(zhuǎn)化細(xì)胞的異體接種
ZA對(duì)REE細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用">    五、NMB_ZA對(duì)REE細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用
ZA轉(zhuǎn)化作用的影響">    六、S9混合物對(duì)FC和NMB_ZA轉(zhuǎn)化作用的影響
ZA誘導(dǎo)REE細(xì)胞UDS">    七、FC和NMB_ZA誘導(dǎo)REE細(xì)胞UDS
    八、N—ras,C—myc和V—erb—B癌基因mRNA在REE細(xì)胞中的表達(dá)
2T三種細(xì)胞癌基因mRNA表達(dá)水平的比較">        1.RE—525,RE—FC和B₂T三種細(xì)胞癌基因mRNA表達(dá)水平的比較
ZA對(duì)RF—525三種癌基因mRNA表達(dá)的影響">        2.FC和NMB_ZA對(duì)RF—525三種癌基因mRNA表達(dá)的影響
2細(xì)胞C—myc mRNA表達(dá)的影響">        3.TPA對(duì)RE—525,RE—FC和B₂細(xì)胞C—myc mRNA表達(dá)的影響
第四章 討論
    一、FC在大鼠體內(nèi)的代謝
    二、FC與大鼠食管DNA結(jié)合
    三、正常大鼠食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)及惡性轉(zhuǎn)化
ZA誘導(dǎo)REE細(xì)胞UDS">    四、FC和NMB_ZA誘導(dǎo)REE細(xì)胞UDS
    五、用原位雜交技術(shù)研究癌基因表達(dá)
第五章 結(jié)論
表格
致謝
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2950182