蝮蛇毒纖溶酶的分離純化和性質(zhì)研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 21:27
目的:從江浙蝮蛇毒中分離純化無(wú)出血作用的纖溶酶,研究其理化性質(zhì),分析末端氨基酸序列,為進(jìn)一步獲得cDNA及全序列分析、基因克隆與表達(dá)及臨床應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)。方法:應(yīng)用Sephadex G-75,DEAE Sepharose Cl-6B柱層析分離純化蝮蛇毒纖溶酶,用纖維蛋白平板測(cè)纖溶活性、pH對(duì)酶活性的影響、抑制劑對(duì)酶活性的影響。用PAGE結(jié)合纖維蛋白覆蓋法定位纖溶組分電泳遷移率。SDS-PAGE測(cè)定分子量,IEF測(cè)定等電點(diǎn),SDS-PAGE分析纖溶酶對(duì)纖維蛋白(原)肽鏈水解特異性。用濁度法研究其對(duì)人富血小板血漿由ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的影響。發(fā)色底物法測(cè)其對(duì)底物S-2238、S-2251的Km值。結(jié)果:用PAGE結(jié)合纖維蛋白覆蓋法定位測(cè)定江浙蝮蛇毒中至少有電泳遷移率為0.159、0.27、0.508、0.841的四個(gè)纖溶組分。從江浙蝮蛇毒中分離純化到一個(gè)電泳遷移率為0.841,分子量為23.8ku,等電點(diǎn)為4.875,無(wú)出血毒性,對(duì)熱穩(wěn)定的纖溶酶。EDTA和β-巰基乙醇能抑制其活性并改變其空間結(jié)構(gòu),Cu2+、Co2+也抑制其活性,PMSF、P...
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
論 文
1. 文中主要英文縮寫
2. 中文摘要、關(guān)鍵詞
3. 英文摘要、關(guān)鍵詞
4. 前言
5. 材料與儀器
6. 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
7. 結(jié)果
8. 討論
9. 結(jié)論
10. 致謝
11. 參考文獻(xiàn)
綜 述
1. 前言
2. 蛇毒纖維蛋白(原)水解酶
3. 蛇毒纖溶酶原激活劑
4. 臨床應(yīng)用與研究
5. 前景與展望
6. 參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]眼鏡蛇毒纖維蛋白原溶解因子的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 朱正光,吳曙光. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1999(05)
[2]五步蛇毒纖溶組分Ⅱ?qū)Υ笫箢i動(dòng)脈血栓的溶栓作用[J]. 陳家樹,俞勵(lì)平,梁秀霞,梁陸光. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 1998(05)
[3]蛇毒纖溶酶的體內(nèi)過(guò)程及藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究[J]. 沈子龍,汪笑菲,廖志勇,王紅,李曉祥. 中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 1997(02)
[4]蛇毒纖維蛋白原水解酶[J]. 毛建平,孫志賢. 動(dòng)物學(xué)雜志. 1997(02)
[5]蚓激酶生物活性檢測(cè)方法的研究[J]. 郝蘇麗,沈佳. 中國(guó)藥事. 1996(06)
[6]尖吻蝮蛇毒纖溶酶的柱層析分離[J]. 雷丹青. 中國(guó)生化藥物雜志. 1996(04)
[7]長(zhǎng)白蝮蛇毒纖溶組分的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 陳子易,王曉輝,王瑛玨,何寶俊. 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1992(05)
[8]短尾蝮蛇毒柱層析分離及酶活性和生理活性的測(cè)定[J]. 韋世秀,湯圣希. 廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1991(01)
[9]蛇毒纖維蛋白溶解酶活力的試管定量測(cè)定法[J]. 唐紹慶,韋世秀,湯圣希. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 1987(04)
[10]蝮蛇蛇毒類纖溶酶的分離純化及一些特性的研究[J]. 舒雨雁,洪息君,儲(chǔ)開疆,李曼玲,班建東,湯圣希. 廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1987(01)
本文編號(hào):2940480
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:45 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
論 文
1. 文中主要英文縮寫
2. 中文摘要、關(guān)鍵詞
3. 英文摘要、關(guān)鍵詞
4. 前言
5. 材料與儀器
6. 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
7. 結(jié)果
8. 討論
9. 結(jié)論
10. 致謝
11. 參考文獻(xiàn)
綜 述
1. 前言
2. 蛇毒纖維蛋白(原)水解酶
3. 蛇毒纖溶酶原激活劑
4. 臨床應(yīng)用與研究
5. 前景與展望
6. 參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]眼鏡蛇毒纖維蛋白原溶解因子的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 朱正光,吳曙光. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1999(05)
[2]五步蛇毒纖溶組分Ⅱ?qū)Υ笫箢i動(dòng)脈血栓的溶栓作用[J]. 陳家樹,俞勵(lì)平,梁秀霞,梁陸光. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 1998(05)
[3]蛇毒纖溶酶的體內(nèi)過(guò)程及藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究[J]. 沈子龍,汪笑菲,廖志勇,王紅,李曉祥. 中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 1997(02)
[4]蛇毒纖維蛋白原水解酶[J]. 毛建平,孫志賢. 動(dòng)物學(xué)雜志. 1997(02)
[5]蚓激酶生物活性檢測(cè)方法的研究[J]. 郝蘇麗,沈佳. 中國(guó)藥事. 1996(06)
[6]尖吻蝮蛇毒纖溶酶的柱層析分離[J]. 雷丹青. 中國(guó)生化藥物雜志. 1996(04)
[7]長(zhǎng)白蝮蛇毒纖溶組分的純化及理化性質(zhì)的研究[J]. 陳子易,王曉輝,王瑛玨,何寶俊. 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1992(05)
[8]短尾蝮蛇毒柱層析分離及酶活性和生理活性的測(cè)定[J]. 韋世秀,湯圣希. 廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1991(01)
[9]蛇毒纖維蛋白溶解酶活力的試管定量測(cè)定法[J]. 唐紹慶,韋世秀,湯圣希. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 1987(04)
[10]蝮蛇蛇毒類纖溶酶的分離純化及一些特性的研究[J]. 舒雨雁,洪息君,儲(chǔ)開疆,李曼玲,班建東,湯圣希. 廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1987(01)
本文編號(hào):2940480
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