目的：觀察小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞在脂多糖(LPS)刺激下表達(dá)炎性趨化性細(xì)胞因子MCP—1及其受體CCR2，抗炎性趨化性細(xì)胞因子FKN及其受體CX3CRl的影響，觀察LPS誘導(dǎo)小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)促炎性細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β升高的作用。觀察β-淀粉蛋白、M-CSF對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞分泌TNF-α的作用。 方法：小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞株N9以含5％小牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)。以液氮凍存復(fù)蘇后的N9作為第一代，選樣第3-8代N9進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。本研究包括2個(gè)部分：(1)以LPS干預(yù)N9，分別于1hour，4hour，12hour，24hour收集細(xì)胞培養(yǎng)上清和貼壁細(xì)胞，對(duì)照組選用未以LPS干預(yù)的N9細(xì)胞。通過(guò)ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中TNF-α的含量，以半定量RT-PCR法檢測(cè)N9表達(dá)MCP-1及具受體CCR2，F(xiàn)KN及其受體CX3CR1，TNF-α和IL—1βmRNA的水平，并觀察LPSF干預(yù)后以上指標(biāo)隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化。 (2)β-淀粉蛋白、M-CSF分別或聯(lián)合干預(yù)N9，作川24hour后收集細(xì)胞培養(yǎng)上清，ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中TNF-α的含量。 結(jié)果：(1)以LPS干預(yù)體外培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞，趨化性細(xì)胞因子MCP-1在LPS作用12h后明顯升高，24h時(shí)已有下降；趨化性細(xì)胞因子FKN在LPS作用12h后持續(xù)升高。炎性趨化性細(xì)胞因子MCP-1的—過(guò)性升高與抗炎性趨化性細(xì)胞因子FKN的持續(xù)增加顯示了二者的區(qū)別。趨化性細(xì)胞因子受體CCR2和CX3CRl在LPS作用4h時(shí)下降最明顯，之后逐漸恢復(fù)。細(xì)胞因子TNF-α在4h時(shí)達(dá)到峰值，IL-1β在LPS作用1h時(shí)即見升高，說(shuō)明促炎性細(xì)胞因子TNF-α和IL-lβ的升高早于趨化性細(xì)胞因子MCP-1和FKN。 (2)β-淀粉蛋白單獨(dú)，或其與協(xié)同因子M-CSF聯(lián)合干預(yù)沒(méi)有顯示明顯的促小膠質(zhì)細(xì)胞分泌FNF-α的作用。 結(jié)論：活化的小膠質(zhì)細(xì)胞可能以增加分泌炎癥因子和抗炎癥因了的方式，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥進(jìn)程的調(diào)節(jié)。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2002
【中圖分類】：R392
【文章目錄】：
1. 中文摘要
2. 英文摘要
3. 前言
4. 材料與方法
5. 結(jié)果與分析
6. 討論
7. 總結(jié)
8. 參考文獻(xiàn)
9. 英文縮寫
10. 致謝
11. 綜述

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 聶盼;MFG-E8在小膠質(zhì)細(xì)胞生理功能中的作用研究[D];西南大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2866022